立克次體(Rickettsia)是一類嚴格細胞內寄生的原核細胞型微生物,在形態(tài)結構、化學組成及代謝方式等方面均與細菌類似:具有細胞壁;以二分裂方式繁殖;含有RNA和DNA兩種核酸;由于酶系不完整需在活細胞內寄生;對多種抗生素敏感等。
對人類致病的立克次體科包括立克次體屬(Rickettsia)、柯克斯體屬(Coxiella)和羅沙利馬體屬(Rochalimaea)等三個屬。立克次體屬又分成三個生物群:斑疹傷寒群、斑點熱群與恙蟲病群(見表17~1)。
立克次體病多數是自然疫源性疾病,且人畜共患。我國除斑疹傷寒、恙蟲病外,已證明有Q熱、斑點熱疫源地存在。節(jié)肢動物和立克次體病的傳播密切相關,或為儲存宿主,或同時為傳播媒介。
一、生物學性狀
。ㄒ)形態(tài)染色與結構
多形態(tài),球桿狀或桿狀,0.3~0.6×0.8~2.0um?驴怂贵w最小,平均大小為0.25×1um,多形性更明顯。最大者為斑點熱群,為0.6×1.2um。在感染細胞內,立克次體常聚集成致密團塊狀,但也可成單或成雙排列。不同立克次體在細胞內的分布不同,可供初步識別。如普氏立克次體常散在于胞質中,恙蟲病立克次體在胞質近核旁,而斑點熱群立克次體則在胞質和核內均可發(fā)現。
革蘭氏染色陰性,但一般著染不明顯,因此常用Giemnez、Giemsa 或Macchiavello法染色,其中以Gimenez法最好。該法著染后,除恙蟲病立克次體呈暗紅色外,其他立克次體均呈鮮紅色。Giemsa法和Macchiavello法分別將立克次體染成紫或藍色和紅色。
立克次體在結構上與革蘭氏陰性桿菌非常相似。用電子顯微鏡觀察,最外層為由多糖組成的粘液層,有粘附宿主細胞及抗吞噬作用。其內為微莢膜或稱外包膜,由多糖或脂多糖組成。細胞壁包括外膜(磷脂雙分子層)、肽聚糖及蛋白脂類三層。有與細菌內毒素性質相似的脂多糖復合物,但脂類含量比一般細菌高得多。胞漿膜為雙層類脂,主要由磷脂組成。胞質內有核糖體(由30s和50s兩個亞基組成)。核質集中于中央,含雙股DNA。
。ǘ)培養(yǎng)特性
立克次體具有相對較完整的能量產生系統(tǒng),能氧化三羧酸循環(huán)中的部分代謝產物,有較獨立的呼吸與合成能力,但仍需人宿主細胞中取得輔酶A、NAD及代謝中所需的能量才能生長繁殖。除戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體外,其他立克次體都為嚴格的真核細胞內寄生。
常用的培養(yǎng)方法有動物接種、雞胚接種及細胞培養(yǎng)。多種病原性立克次體能在豚鼠、小鼠等動物體內有不同程度的繁殖。在豚鼠睪丸內保存的立克次能保持致病力和抗原性不變。立克次體還能在雞胚卵黃囊中繁殖,常用作制備抗原或疫苗的材料。常用的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)有敏感動物的骨髓細胞、血液單核細胞和中性粒細胞等,一般不產生細胞病變。一般認為宿主細胞的新陳代謝不太旺盛時有利于立克次體的生長繁殖,因此接種立克次體以32~35℃孵育最為適宜。
表17-1 對人類致病的立克次體
屬 | 生物型 | DNA的G+Cmol% | 細胞內定位 |
抗原結構 |
媒介 | 儲存宿主 | 所致疾病 | 外斐氏反應 | ||
可溶性抗原 | 顆粒性抗原 | |||||||||
立克次體屬 | 斑疹傷寒群 | 普氏立克次體 | 29 | 胞漿內 | 群特異性 | 種特異性 | 虱 | 人 | 流行性
斑疹傷寒 |
OX19 |
莫氏立克次體 | 29 | 胞漿內 | 群特異性 | 種特異性 | 蚤 | 鼠類 | 地方性
斑疹傷寒 |
OX19 | ||
加拿大立克次體 | 29 | 核內 | 群特異性 | 種特異性 | 蜱 | 兔? | 類似
斑點熱? |
不明 | ||
斑點熱群 | 立氏立克次體 | 33 | 胞漿內和核內 | 群特異性 | 種特異性 | 蜱 | 各種嚙齒類、狗、鳥類 | 落磯山
斑點熱 |
OX19,OX2 | |
西伯利亞立克次體 | 33 | 胞漿內和核內 | 群特異性 | 種特異性 | 蜱 | 嚙齒類、家畜、鳥類 | 北亞熱 | OX19,OX2 | ||
康氏立克次體 | 33 | 胞漿內和核內 | 群特異性 | 種特異性 | 蜱 | 嚙齒類、狗 | 鈕扣熱 | OX19,OX2 | ||
澳大利亞立克次體 | 33 | 胞漿內和核內 | 群特異性 | 種特異性 | 蜱 | 嚙齒類、有袋動物、家鼠、田鼠 | 昆士
蘭熱 |
OX19,OX2 | ||
小株立克次體 | 33 | 胞漿內和核內 | 群特異性 | 種特異性 | 革螨 | 嚙齒類、有袋動物、家鼠、田鼠 | 立克
次痘 |
陰性 | ||
恙蟲病群 | 恙蟲病
立克次體 |
? | 胞漿內 | 株特異性 | 種與型特異性 | 恙螨 | 各種嚙齒類、小哺乳類 | 恙蟲病 | OX | |
柯克斯體屬 | 貝納氏柯克斯體 | 43~45 | 胞漿空泡內 | 無 | 種特異性 | 蜱 | 野生小動物、羊、牛 | Q熱 | 陰性 | |
羅沙利巴體屬 | 戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體 | 39 | 胞外 | 種特異性 | 種特異性 | 虱 | 人 | 戰(zhàn)壕熱 | 陰性 |
只有戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體能在節(jié)肢動物細胞外生存,并在無細胞培養(yǎng)基中生長。
。ㄈ)抗原結構
立克次體有兩種主要抗原,一種為可溶性(醚類)抗原,耐熱,與細胞壁表面的粘液層有關,為群特異性抗原。另一種為顆粒(外膜)性抗原,不耐熱,與細胞壁成份有關,為種特異性抗原。
在斑疹傷寒群,群特異性抗原在普氏、莫氏及加拿大立克次體中均存在,與其他屬的立克次體很少交叉或不交叉,而種特異性蛋白抗原在上述三個種間互不交叉。
斑點熱群的情形與比相似,有共同的群特異性抗原及各個種的種特異性抗原,后者在某些種間有一定的交叉。
恙蟲病群中只有恙蟲病立克次體一個種,其群特異性抗原即種特異性抗原,根據恙蟲病立克次體種特異性抗原性的差異,可分為若干血清型。
斑疹傷寒等立克次體具有與變形桿菌某些X株的菌體抗原(O)共同的耐熱多糖類抗原(表17~2),因而臨床上常用以代替相應的立克次體抗原進行非特異性凝集反應,作為人或動物血清中相關抗體的檢查。這種交叉凝集試驗稱為外斐反應(Weii-Felix reaction),作為輔助診斷。
表17-2 主要立克次體與變形桿菌菌株抗原交叉現象
立克次體 | 變形桿菌菌株 | ||
OX19 | OX2 | OXK | |
普氏立克次體
莫氏立克次體 恙蟲病立克次體 Q熱柯克斯體 戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體 |
+++
+++ - - - |
+
+ - - - |
-
- +++ - - |
(四)抵抗力
除貝鈉(Q熱)柯克斯體外,立克次體對理化因素的抵抗力與細菌繁殖體相似。56℃30分鐘死亡;室溫放置數小時即可喪失活力。對低溫及干燥的抵抗力強,在干燥虱糞中能存活數月。對一般消毒劑敏感,對四環(huán)素和氯霉素敏感;前奉愃幬锊粌H不能抑制反而促進立克次體的生長、繁殖。