十二、實驗動物的處死方法
。ㄒ)蛙類
常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊椎的方法處死。將蛙用溫布包住,露出頭部,左手執(zhí)蛙,并且用食指按壓其頭部前端,拇指按壓背部,使頭前俯;右手持金屬探針由頭前端沿線向尾方刺觸,觸及凹陷處即枕骨大孔所在。將探針由凹陷處垂直刺入,刺破皮膚即入枕骨大孔。這時將探針尖端轉(zhuǎn)向頭方,向前探入顱腔,然后向各方攪動,以搗毀腦組織,如探針確在顱腔內(nèi),實驗者可覺出針在四面皆壁的腔內(nèi)。腦組織搗毀后,將探針退出,再由枕骨大孔刺入,并轉(zhuǎn)向尾方,與脊柱平行刺入椎管,以破壞脊髓。腦和脊髓是否被完全破壞,可檢查動物四肢肌肉的緊張性是否完全消失。拔出探針后,用一小干棉球?qū)⑨樋锥伦,以防止其出血?/P>
操作過程中要防止毒腺分泌物射入實驗者眼內(nèi)。如被射入時,即需立即用生理鹽水沖洗眼睛。
。ǘ)大鼠和小鼠
1.脊椎脫臼法
右手抓住鼠用力向后拉,同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭,將脊髓與腦髓拉斷,鼠便立即死亡。
2.斷頭法
實驗者戴上棉綠紗手套,用右手握住大鼠頭部,左手握住背部,露出頸部,助手用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉。小鼠處死法相同。
3.擊打法
右手抓住鼠尾,提起,用力摔擊其頭部,鼠痙攣后立即死亡。用小木錘用力擊打鼠頭部也可致死。
4.急性大失血法
可采用鼠眼眶動脈和靜脈急性大量失血方法使鼠立即死亡。
5.化學(xué)致死法
吸入一氧化碳,大、小鼠在一氧化碳濃度為0.2-0.5%環(huán)境中即可致死。
皮下注射士的年,吸入乙醚、氨仿,均可致死。士的年注射量,小鼠為0.76~2.0mg/kg體重,大鼠3.0-3.5ml/kg體重。氯化鉀處死大鼠劑量:25%溶液0.6ml/只靜脈注入。
(三)狗、貓、兔、豚鼠
1.空氣栓塞法
向動物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣,使之發(fā)生栓塞而死。當(dāng)空氣注入靜脈后,可在右心隨著心臟的跳動使空氣與血液相混致血液成泡沫狀,隨血液循環(huán)到全身。如進入肺動脈,可阻梗其分支,進入心臟冠狀動脈,造成冠狀動脈阻塞,發(fā)生嚴重的血液循環(huán)障礙,動物很快致死。一般兔、貓等靜脈內(nèi)注入20-40ml空氣即可致死。每條狗由前肢或后肢皮下靜脈注入80~150ml空氣,可很快致死。
2.急性失血法
先使動物輕度麻醉,如狗可按每公斤體重靜脈注射硫噴妥納20-30mg,動物即很快入睡。暴露股三角區(qū),用鋒利的殺狗刀在股三角區(qū)作一個約10cm的橫切口,把股動、靜脈全切斷,立即噴出血液。用一塊濕紗布不斷擦去股動脈切周圍處的血液和血凝塊,同時不斷的用自來水沖洗流血,使股動脈切口處保持暢通,動物3~5分鐘內(nèi)即可致死。采用此種方法,動物十分安靜,對臟器無損傷,對活殺采集病理切片標本是一種較好的方法。醫(yī)學(xué).全在線www.med126.com
3.破壞延腦法
如果急性實驗后,腦已暴露,可用器具將延髓破壞,導(dǎo)致動物死亡。對家兔也可用木錘用力錘擊其后腦部,損壞延腦,造成死亡。
4.開放性氣胸法
將動物開胸,造成開放性氣胸。這時胸膜腔的壓力與大氣壓力相等,肺臟因受大氣壓縮發(fā)生肺萎陷,縱隔擺動,動物窒息而死。
5.化學(xué)藥物致死法
靜脈內(nèi)注入一定量的氯化鉀溶液,使動物心肌失去收縮能力,心臟急性擴張,致心臟馳緩性停跳而死亡。每條成年兔由兔耳緣靜脈注入10%氯化鉀溶液5~10ml;每條成年狗由狗前肢或后肢下靜脈注入20~30ml。即可致死。
靜脈內(nèi)注入一定量的福爾馬林溶液,使血液內(nèi)蛋白凝固,動物由于全身血液循環(huán)嚴重障礙和缺氧而死。每條成年狗靜脈注入10%福爾馬林溶液20ml即可致死。也可將福爾馬林與酒精按一定比例配成動物致死液應(yīng)用。
皮下注射士的年致死:豚鼠劑量為3.0-4.4mg/kg體重,兔0.5-0.5mg/kg體重,狗0.3-0.42mg/kg體重,貓1.0-2.0mg/kg體重。
經(jīng)口或注年DDT致死;(LD50):豚鼠:經(jīng)口0.4g/kg體重,皮下0.9g/kg體重。兔:經(jīng)口0.3g/kg體重,皮下0.25g/kg體重;靜脈0.043g/kg體重。狗:靜脈0.067g/kg體重。