醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的綜合性實驗
微生物學(xué)教研室 龍 敏 龍北國 別平華 羅 軍
在傳統(tǒng)的實驗課教學(xué)中，講完一個章節(jié)的理論知識之后就安排一次實驗課，主要用來驗證理論。但這種安排缺乏系統(tǒng)性；再則，教師需作大量實驗準(zhǔn)備工作，而學(xué)生真正動手機會很少，不利于學(xué)生各方面能力的培養(yǎng)．從1994年開始，我們對臨床醫(yī)學(xué)（含七年制)等專業(yè)的微生物實驗課進(jìn)行了改革，重新編寫實驗教材，設(shè)計了3項綜合性系列實驗，實踐證明取得了滿意的效果。
一、3項綜合性實驗設(shè)計
共計30學(xué)時，實驗課與理論課比例為0.6:1。
1．模擬膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測 膿汁標(biāo)本中混有金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌；糞便標(biāo)本中混有大腸桿茵、傷寒桿菌（或痢疾桿菌、乙型副傷寒桿菌、變形桿菌)。主要是利用微生物學(xué)常規(guī)實驗方法來研究需氧菌，包括：（1)培養(yǎng)基的制備（含消毒與滅菌法)；（2)病原菌的分離與培養(yǎng)；（3)細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查；（4)細(xì)菌的生化反應(yīng)；高級職稱考試網(wǎng)（5)血清學(xué)反應(yīng)，（6)細(xì)菌的藥物敏感性試驗．
2．幽門螺桿菌（HP)的PCR－RFLP分型 該項是本教研室目前正在開展的科研課題。主要是利用先進(jìn)的分子微生物學(xué)技術(shù)來研究微需氧茵（厭氧菌)，包括：（1)從胃粘膜活檢標(biāo)本中分m.quanxiangyun.cn/job/離培養(yǎng)HP；（2)HP形態(tài)學(xué)檢查及生化反應(yīng)鑒定，（3)HP染色體DNA的提��；（4)HP尿素酶C因的PCR擴增；（5)PCR擴增產(chǎn)物的核酸內(nèi)切酶（ALU)酶切；（6)瓊脂糖凝膠電泳分析．以上二項系列實驗安排在細(xì)菌學(xué)總論和病原性球菌、腸道桿菌理論課授完之后進(jìn)行，共集中22學(xué)時，其中正式實驗20學(xué)時、實驗設(shè)計1學(xué)時、論文撰寫方法1學(xué)時，在連續(xù)3個星期內(nèi)完成．
3．病毒的血球抑制凝集試驗 主要訓(xùn)練病毒培養(yǎng)及檢測方法，具體內(nèi)容有：（1)雞胚檢查；（2)流感病毒的雞胚培養(yǎng)法；（3)雞胚尿羹液的收集；（4)流感病毒的血凝試驗；（5)流感病毒血球抑制凝集試驗。安排在病毒學(xué)總論和呼吸道病毒理論課后，集中4學(xué)時。
最后實驗論文宣讀2學(xué)時，實驗操作考試2學(xué)時。
二、具體實施步驟
1．首先明確提出實驗課的總體思路和需要解決的問題，規(guī)定一些參考文獻(xiàn)，動員學(xué)生查閱書本和實驗教材，寫出實驗設(shè)計。上第一次實驗課時，每個實驗室推出一位代表做重點發(fā)言，報告實驗設(shè)計方案，再由其他學(xué)生補充或更正，最后由教師幫助學(xué)生修改、完善實驗設(shè)計，對設(shè)計中富有創(chuàng)造性的成份，應(yīng)給予明確肯定。
2．學(xué)生領(lǐng)取所需實驗材料，正式進(jìn)行實驗。分小班進(jìn)行，學(xué)生2人一個實驗組。課堂上教師精講、少講理論，主要通過提出一些有針對性的問題來引導(dǎo)學(xué)生去思考，對難以掌握的實驗操作技術(shù)要準(zhǔn)確、反復(fù)地示范，嚴(yán)格把關(guān)。
3．學(xué)生及時記錄、整理實驗結(jié)果，待第一個綜合性實驗完成后，由教師講授論文撰寫方法，按照科研論文的基本格式，每位學(xué)生寫出實驗論文。最后挑選出數(shù)名論文寫得較好的學(xué)生在全年級宣讀，每人15分鐘左右．
4．實驗課成績由論文和實際操作考試的分?jǐn)?shù)構(gòu)成，共計15分，納人總評成績。
三、實踐效果反饋
1．有利于培養(yǎng)學(xué)生動手能力和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲凶黠L(fēng)．綜合性實驗由幾個不同的小試驗組成，將所有要求掌握的基本實驗技能有機地結(jié)合起來，研究病原菌的檢測和分型，引導(dǎo)學(xué)生綜合運用所學(xué)知識、技術(shù)去解決實際問題。教師只提供必要的器材和試劑，具體操作由學(xué)生單獨完成，并且基本實驗技術(shù)反復(fù)應(yīng)用．因此，大大增強了學(xué)生動手機會，加強了基本技能的訓(xùn)練．由于綜合性實驗是一個連續(xù)的過程，任何一個步驟（環(huán)節(jié))的失誤都將直接影響最終實驗結(jié)果。為了保證實驗的成功，要求學(xué)生務(wù)必注意嚴(yán)格地執(zhí)行無菌操作，操作規(guī)范，取樣準(zhǔn)確，觀察仔細(xì)，記錄及時，來不得半點虛假．無論實驗的成敗，學(xué)生們都將悟出培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲凶黠L(fēng)的重要性．整個實驗是每2人一組，需要相互配合，共同觀察、分析結(jié)果，這在一定程度上培養(yǎng)了學(xué)生科研協(xié)作的能力。
2．有利于培養(yǎng)學(xué)生對科研工作的興趣 讓大學(xué)生早日接觸科研是智能培養(yǎng)的一個重要
環(huán)節(jié)。綜合性實驗展示了一個科研的基本過程，包括問題提出、查閱文獻(xiàn)、寫出設(shè)計、正式實驗、整理和分析實驗結(jié)果、撰寫和宣讀論文，實際上是臨床微生物學(xué)科研工作的一種模擬。我們要求學(xué)生嚴(yán)格按照科研論文格式，即題目（自擬)、引言、材料與方法、結(jié)果、討論，寫出實驗論文，而不是沿用傳統(tǒng)的做法寫幾個實驗報告，這對鍛煉學(xué)生的科研論文的寫作能
力大有幫助。由于我們強調(diào)對有獨到見解的論文給予高分，因此，學(xué)生都能實事求是地報告和分析自己的實驗結(jié)果，尤其是對不理想的結(jié)果加以討論，從而得出一些與眾不同的觀點。
3．有利于充分調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性 傳統(tǒng)的微生物學(xué)實驗課主要是為了驗證理論知
識，學(xué)生不需要預(yù)習(xí)、看書，照樣可以出預(yù)期結(jié)果，完全處于被動式學(xué)習(xí)．我們開設(shè)的綜合性實驗有4個特點：（1)既包括傳統(tǒng)的基本實驗方法，又反映了現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，具有先進(jìn)性、實用性，并和教研室開展的科研課題結(jié)合起來．（2)要求學(xué)生解決病原菌檢測和分型這一實際問題，目的十分明確．（3)模擬膿汁和糞便標(biāo)本中混有的病原菌對學(xué)生來說是未
知的，而且各組并不完全相同，具有一定探索性，從而迫使學(xué)生認(rèn)真去查閱書本或文獻(xiàn)，寫出可行的實驗設(shè)計，全面了解實驗內(nèi)容、方法與原理，運用所學(xué)知識縱橫聯(lián)系，去預(yù)測、記錄、分析、討論實驗中所出現(xiàn)的正�；虍惓＝Y(jié)果，最終引出合乎邏輯的結(jié)論。（4)實驗完畢，對實驗論文給出分?jǐn)?shù)，并對學(xué)生的基本操作能力、觀察能力、分析判斷能力、表達(dá)報告能力等加以考核，準(zhǔn)備幾個實驗，采用抽簽方式，抽到什么考什么。學(xué)生們認(rèn)為：“實驗考試有利于促進(jìn)重視實驗課，并去努力提高實際操作能力．”“微生物學(xué)實驗內(nèi)容豐富、形式新穎，受益匪淺�！�
我們認(rèn)為，集中時間進(jìn)行實驗教學(xué)，有利于系統(tǒng)地、完整地掌握從理論到實驗各個部分的內(nèi)容，便于學(xué)生自己設(shè)計、獨立操作，加強基本技能的訓(xùn)練，充分調(diào)動學(xué)習(xí)的積極性，學(xué)生各種實際能力得到著重培養(yǎng)。
《中國高等醫(yī)學(xué)教育》1996年第6期P30-31
