Key words: Sodiumorthovanadate; Chickpea; Diabetes mellitus; Rat, Wistar 糖尿病(diabetes mellitus, DM)的治療包括飲食控制、注射胰島素和口服降糖藥等,但均不能有效防止并發(fā)癥的發(fā)生[1],因此研究新的糖尿病防治策略具有重要的臨床意義[2]。
從釩發(fā)現(xiàn)至今的100多年研究中,最受關(guān)注的是它的抗糖尿病作用,但該作用需要較高的劑量,會(huì)引起多系統(tǒng)毒副反應(yīng)[3]。為了發(fā)揮釩化合物的降糖生化潛能、降低其毒性,研究者們嘗試釩與不同配體形成有機(jī)釩化合物的療效,發(fā)現(xiàn)其聯(lián)合作用明顯好于釩及配體的單獨(dú)使用[4]。中藥和植物降糖保健治療作用也一直受到臨床的關(guān)注[5],如維藥記載的鷹嘴豆即是其中的一種。本實(shí)驗(yàn)用天山鷹嘴豆聯(lián)合低劑量原釩酸鈉治療糖尿病模型大鼠,對(duì)它們單獨(dú)和聯(lián)合使用的療效進(jìn)行比較,以觀察釩和鷹嘴豆聯(lián)合應(yīng)用的效果。
1 材料與方法
1.1 飼料的準(zhǔn)備 精選新疆天山鷹嘴豆,室溫干燥保存。鷹嘴豆芽的培植參照Burguillo等的方法[6],于室溫(25~27)℃、相對(duì)濕度70%,陶器內(nèi)避光培育5?d而成,60?℃恒溫烤箱內(nèi)過夜烘干,研磨成粉。未經(jīng)培育的鷹嘴豆直接研磨成粉。豆粉和豆芽粉分別按5%的比例與基礎(chǔ)飼料混合加工成干預(yù)飼料(即每100?g飼料中含5?g豆粉或豆芽粉和95?g?基礎(chǔ)飼料)[7]。
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性Wistar大白鼠,58只,體重155~190?g。實(shí)驗(yàn)過程中大鼠的飼養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定,保持室溫在(25±2)℃,相對(duì)濕度(55±5)%,燈光控制12?h?晝夜交替,基礎(chǔ)飼料(由山東米歇爾生物制品有限公司提供,中國 泰安)飼喂1周后進(jìn)行分組。
1.3 實(shí)驗(yàn)分組 空腹24?h后,大鼠按簡單隨機(jī)法分為正常對(duì)照組(C)8只和糖尿病組50只,糖尿病組大鼠接受一次性尾靜脈注射鏈脲佐菌素(45?mg/kg,溶解于新鮮配制的0.1?mmol/L枸櫞酸緩沖液,pH4.5)成模,正常對(duì)照組注射相同容量的0.1?mmol/L枸櫞酸緩沖液。10?d?以后剪尾(1?mm)取血用血糖儀(羅氏二代血糖儀,強(qiáng)生牌血糖試紙)測試大鼠非空腹血糖,血糖超過15?mmol/L為糖尿病成模大鼠,共48只,隨后被隨機(jī)分為以下6組:糖尿病對(duì)照組(D)、糖尿病原釩酸鈉治療組(D+V)、糖尿病鷹嘴豆治療組(D+P)、糖尿病鷹嘴豆芽治療組(D+Ps)、糖尿病鷹嘴豆和低劑量原釩酸鈉治療組(D+P+V)、糖尿病鷹嘴豆芽和低劑量原釩酸鈉治療組(D+Ps+V)醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站m.quanxiangyun.cn。
1.4 糖尿病模型大鼠的干預(yù)和處理 D組大鼠不予任何治療干預(yù),飼喂基礎(chǔ)飼料和自來水;(D+V)組大鼠給以原釩酸鈉(為減少不良反應(yīng)先從低劑量0.2?mg/mL開始,隔日增至0.4?mg/mL,1周后為0.5?mg/mL)飲水治療,為降低釩的毒性作用,將原釩酸鈉溶于含0.5%NaCl的水中飲用,飼喂基礎(chǔ)飼料;(D+P)組飼喂5%鷹嘴豆飼料和自來水;(D+Ps)組飼喂5%鷹嘴豆芽飼料和自來水;(D+P+V)組飼喂5%鷹嘴豆飼料和低劑量原釩酸鈉(溶于含0.5%NaCl的自來水)水溶液(0.2?mg/mL);(D+Ps+V)組飼喂5%鷹嘴豆芽飼料和低劑量原釩酸鈉水溶液(0.2?mg/mL)。每周1次于相同時(shí)間測量動(dòng)物血糖和體重。上述治療持續(xù)4周時(shí),對(duì)大鼠行股動(dòng)脈插管,留取空腹血備查血糖、血脂、血漿胰島素、肝功和腎功,然后進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn),管喂2?g/kg葡萄糖后,分別于30、60、90和120?min測量血糖值。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS11.0軟件,所有數(shù)據(jù)以±s表示,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié) 果
2.1 鷹嘴豆芽和原釩酸鈉對(duì)糖尿病大鼠體重、血糖的影響 見表1。與C組相比,D組大鼠的體重隨病程進(jìn)展明顯下降(P<0.05),而各糖尿病治療組中除(D+P)組,其他各組大鼠體重均隨治療進(jìn)程逐漸增加,其中,(D+Ps)組、(D+P+V)組和(D+Ps+V)組均明顯高于D組和(D+P)組(P<0.05);而(D+V)組體重,增加不明顯。
D組血糖是C組的4倍。D組血糖隨病程進(jìn)展持續(xù)增加;各治療組血糖隨治療不同程度下降,從第2周開始均明顯低于D組;其中(D+P)組和(D+Ps)組的血糖在治療的第1、2周開始下降卻并不理想,仍明顯高于C組和其他3個(gè)治療組;(D+P+V)組和(D+Ps+V)組血糖控制效果較理想,已達(dá)到(D+V)組水平,且與C組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,自治療后第1周血糖開始下降,一直持續(xù)到治療后4周。