�；撬岬窝垡海�牛磺酸－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定牛磺酸滴眼液中�；撬岬暮�量。

本方法適用于�；撬岬窝垡�。

供試品加水稀釋后，取適量依次加入碳酸氫鈉溶液（pH9.0)及1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液，置60℃水浴中加熱1小時后取出，冷至室溫，加磷酸鹽緩沖液（pH7.0)稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長360nm處檢測�；撬岬姆迕娣e，計算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸鹽緩沖液（pH7.0)

3. 0.1mol/L氫氧化鈉溶液

4. 0.5mol/L碳酸氫鈉溶液（pH9.0)

5. 1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按牛磺酸衍生物峰計算應(yīng)不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：磷酸鹽緩沖液（pH7.0) 乙腈 水=70 15 15

2.2 檢測波長：360nm

2.3 柱溫：室溫

1. 磷酸鹽緩沖液（pH7.0)

取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1mL，用水稀釋至100mL。

2. 0.1mol/L氫氧化鈉溶液

取氫氧化鈉適量，加水振搖使溶解成飽和溶液，冷卻后，置聚乙烯塑料瓶中，靜置數(shù)日，澄清后備用。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6mL，加新沸過的冷水使成1000mL，搖勻。

3.稱取供試品

精密量取供試品3mL為供試品。

4. 對照品溶液的制備

精密稱取�；撬釋φ掌愤m量，加水制成每1mL約含1.5mg的溶液，即為對照品溶液。

5. 供試品溶液的制備

取供試品置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL，置10mL量瓶中，依次加入0.5mol/L碳酸氫鈉溶液（pH9.0)1mL，1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液0.5mL，搖勻，置60℃水浴中加熱1小時后取出，冷至室溫，加磷酸鹽緩沖液（pH7.0)稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長360nm處測定�；撬幔–₃₀H₄₈O₃)的峰面積，計算出其含量。