方法名稱:
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方法名稱: |
葛芪通脈顆粒-葛根素的測定-高效液相色譜法 |
應用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測定葛芪通脈顆粒中葛根素的含量。 本方法適用于葛芪通脈顆粒中葛根素的含量測定。 |
方法原理: |
供試品研成細粉,用甲醇回流提取后,過濾,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長250nm處檢測葛根素的吸收值,計算出其含量。 |
試劑: |
1.甲醇(色譜醇) 2.二次重蒸水 3.甲醇 4.磷酸 5.乙醇 |
儀器設備: |
1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱:十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。 1.3 紫外吸收檢測器 2 色譜條件 2.1 流動相:甲醇+水 磷酸(25:75:1);流速:0.8ml/min。 2.2 檢測波長:250nm 2.3 溫度:40℃。 |
試樣制備: |
1. 對照品溶液的制備 準確稱取葛根素對照品5 mg,置25 mL量瓶中,加乙醇稀釋至刻度,搖勻,精密量取2mL,置于10mL量瓶中,加乙醇至刻度,搖勻,作為對照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 取葛茂通脈顆粒,研成細粉。取約2.5g,精密稱定,置250 ml圓底燒瓶中,加甲醇50 ml,振搖。加熱回流2小時,放冷,過濾至100 ml量瓶中,用甲醇洗滌殘渣3次,每次10 ml,過濾至同一量瓶中。精密量取2 ml,置25 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長252nm處測定葛根素的吸收值,計算出其含量。 |
參考文獻: |
藥學進展,葛芪通脈顆粒中葛根素的HPLC分析,2003,27(5),p296。 |