廣防風顆�！獜V防風苷A測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定廣防風苷A的含量

本方法適用于廣防風(Epimeredi indica(L.) Rothmalex)根單味中藥制成的顆粒。

采用高效液相色譜外標法測定廣防風顆粒中的廣防風苷A含量。

1. 乙腈為色譜純；

2. 甲醇

3. 廣防風苷A對照品（自制)

1 儀器

1.1 液相色譜儀

1.2 紫外檢測器

1.3 色譜柱Discovery C₁₈色譜柱(250mm×4.6mm)

1.4. 電子分析天平

2 試驗條件

2.1流動相∶乙腈＋水=27＋73

2.2 流速：1.0ml·min^-1，

2.3 檢測波長：320nm

2.4 柱溫：室溫

2.5 系統(tǒng)適應性： 理論塔板數(shù)以廣防風苷A峰計算應不低于2000；分離度均大于1.5。

1.照品溶液的制備

精密稱取廣防風苷A對照品(80℃干燥至恒重)5mg，加甲醇超聲溶解，定容至25mL，作為對照品溶液。精密吸取對照液各0.4，0.8，1.2mL，1.6，2.0mL，分別用甲醇定容至2mL，搖勻，得濃度分別為39.6，79.2，118.8， 158.4，198μg·mL^-1的廣防風苷A標準液。

2.供試品溶液的制備

精密稱取廣防風顆粒1.17g，加水超聲溶解，定容至10mL，取溶液于13000r·min^-1下離心10min，上清液作為供試樣品溶液。

1.標準曲線的制備

在上述色譜條件下，各進樣20μL。以峰面積(y)為縱坐標，廣防風苷A的濃度(x)為橫坐標，進行線性回歸，計算回歸方程Y=20.139X- 154.35；r=0.9994；)，線性范圍：0.792～3.960μg。

2.樣品測定

取供試品溶液適量，注入液相色譜儀，測定峰面積，外標法計算含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。