八珍益母丸—芍藥苷的測定—高效毛細管電泳法

本方法采用高效毛細管電泳測定八珍益母丸中芍藥苷的含量。

本方法適用于八珍益母丸（水蜜丸)。

供試品于錐形瓶中，加50%乙醇浸漬，濃縮，濃縮液進入高效毛細管電泳儀進行分離，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處檢測芍藥苷的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2.硼砂（分析純)

3.芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

4.八珍益母丸(水蜜丸) (市售品)

1 儀器

1.1 高效毛細管電泳儀，微孔濾膜(0.45μm) 及過濾裝置，超純水器

1.2 色譜柱

融熔石英毛細管柱(未涂漬) 50μm ×50cm。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：50mmol/L 硼砂緩沖液,用氫氧化鈉調pH為10.6。

2.2 檢測波長：230nm

2.3柱溫： 20℃

1 稱取供試品

水蜜丸約6g，精密稱定。

2 對照品溶液的制備

精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥36h 的芍藥苷10.0mg ,用甲醇定容成濃度為1.0mg/ml 的對照品儲備液。取儲備液500μl ,置于1ml 容量瓶中,加運行緩沖液至刻度,進樣,測定。

3供試品溶液的制備

將供試品加5 g 硅藻土混合, 研細, 置50 mL 具塞錐形瓶中,加50%乙醇40mL，于40℃水浴浸漬4h，時時振搖, 濾過, 濾渣用50 %乙醇洗滌6次, 每次10 mL , 洗滌液與濾液合并, 濃縮,殘渣加50 %乙醇溶解, 轉移至10 mL 量瓶中, 用50 %乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 即得。

1.標準曲線的繪制

分別取芍藥苷儲備液62.5 、125、250 、500 、1 000μl ,用超純水定容至1ml ,依次進樣后,以藥物濃度(C) 對峰面積與遷移時間之比值(X) 進行回歸。

2.供試品的測定

運行緩沖液:50mmol/L 硼砂緩沖液,用氫氧化鈉調pH為10.6 ; 操作電壓: 20KV , 極性由正到負;采用壓力進樣,壓力進樣常數(shù)為10psi×S。運行緩沖液和樣品溶液均經(jīng)0.45μm 微孔濾膜過濾后使用。

毛細管沖洗方法: 每次開機用超純水沖洗3min , 后用0.1mol/L 氫氧化鈉沖洗3min ,再用超純水沖洗3min ,然后運行緩沖液沖洗3min 。每次測定之間用運行緩沖液沖洗1min 。

供試品溶液壓力進樣各1nL到高效毛細管電泳儀，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處測定芍藥苷的吸收值，外標法計算出其含量。

陳勇川，朱衛(wèi)民，劉松青.高效毛細管電泳法測定八珍丸和八珍益母丸中芍藥苷的含量.中國藥房，2003，13（7)：425-427