更年安片 –大黃素的測定--高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定更年安片中大黃素的含量。

本方法適用于中成藥更年安片。

供試品加甲醇，熱回流提取，濾過，取續(xù)濾液減壓回收至干。殘渣加水，加鹽酸及氯仿，加熱回流，分取氯仿層，水層用氯仿提取多次后，合并氯仿提取液，減壓回收至干。殘渣加甲醇溶解，并稀釋至一定體積，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外-可見分光光度計，于波長437nm處檢測大黃素的吸收值，計算出其含量。

1. 乙腈

2.冰醋酸

3 .甲醇

4 .鹽酸

5 .氯仿

1高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按大黃素峰計應不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 水 冰醋酸 = 60 40 1

2.2 檢測波長：437nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，求得每片平均重量，研細，精密稱取粉末約5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取大黃素對照品約10mg, 置100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25mL，置200mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻（每1mL中含大黃素12.5μg)。

3. 供試品溶液的制備

供試品置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25mL，減壓回收至干，殘渣加水20mL，加鹽酸2mL，加氯仿20mL，加熱回流30分鐘，放冷，分取氯仿層，水層再用氯仿振搖提取3次，每次10mL，合并氯仿液，減壓回收至干，殘渣加甲醇使溶解，轉移至25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱定”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL，注入高效液相色譜儀，紫外-可見分光光度計，于波長437nm處測定大黃素（C₁₅H₁₀O₅)的吸收值，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p.469。