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黃芩細(xì)胞—黃芩苷的含量測(cè)定方法—HPLC-UV

  
方法名稱:
  黃芩細(xì)胞—黃芩苷的含量測(cè)定—HPLC-UV
應(yīng)用范圍:
  用于懸浮培養(yǎng)黃芩細(xì)胞中黃芩苷的含量測(cè)定
方法原理:
 本品用甲醇超聲提取,離心,取上清液,經(jīng)液相色譜儀分離,在280nm處測(cè)定,外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  Agilent 1100 型高液相色譜儀(美國惠普公司) 。

色譜條件 色譜柱:Agilent Zorba×80A ExtendC18 (150mm×4. 6mm,3.5μm);流動(dòng)相:甲醇-0.5%磷酸溶液(50:50) ;柱溫:30℃;流速:1ml·min-1 ;檢測(cè)波長(zhǎng):280nm;進(jìn)樣量:10μl。
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五化二磷減壓干燥至恒重的黃芩苷對(duì)照品6.10mg,置5ml量瓶中,加甲醇溶解并定容,搖勻,即得1.22 mg·ml-1的黃芩苷對(duì)照品溶液。

樣品溶液的制備  培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)50℃過夜、干燥至恒重后,取0.50g,加入50ml甲醇,超聲提取30min,離心10min (5 ×103 r·min-1 ),收集上清液,再加入50ml甲醇,重復(fù)超聲提取、離心。合并兩次上清液,濃縮至干,加甲醇溶解定容至50ml,作為樣品溶液。
操作步驟:
  在上述色譜條件下,分別吸取對(duì)照品和供試品溶液各10μl 進(jìn)樣,測(cè)定峰面積值,按外標(biāo)法計(jì)算含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:m.quanxiangyun.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  張進(jìn)杰,徐茂軍,俞堅(jiān). HPLC測(cè)定懸浮培養(yǎng)黃芩細(xì)胞中黃芩苷的含量. 華西藥學(xué)雜志.2006,21 (6) : 575~576
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