紅豆杉—紫杉醇的含量測(cè)定方法—HPLC-UV

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方法名稱：

紅豆杉—紫杉醇的含量測(cè)定—HPLC-UV

應(yīng)用范圍：

用于人工栽培南方紅豆杉中紫杉醇的含量測(cè)定

方法原理：

本品粉末用二氯甲烷∶甲醇（1∶1)回流提取，濃縮，二氯甲烷萃取后，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm處測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：

儀器設(shè)備 A lltech 426 型高效液相色譜儀；200型紫外檢測(cè)器；Alltech 外置工作站。

色譜條件色譜柱：A llt im a C18 5μ柱(5 mm×250 mm )；流動(dòng)相：甲醇-水 (65∶35) ；流量：1.0ml/min；檢測(cè)波長：227nm；進(jìn)樣量: 20μL；柱溫：室溫。

試樣制備：

對(duì)照品溶液的制備

供試品溶液的制備將人工栽培南方紅豆杉種子、枝條、葉子和皮于 40 ℃干燥后碾成粉末(過孔徑為 0. 32 mm 的篩)，分別精確稱取2.5g 于200 mL三角瓶中，用100mL甲醇-二氯甲烷(1∶1)混合溶劑浸泡24h，次日超聲震蕩提取30min，過濾，殘?jiān)眉状紱_洗3次，合并濾液，30℃下減壓濃縮，提取物用水(50mL×3)和正己烷(50mL×3)萃取，水層用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷萃取液，然后用活性炭(5 g)脫色，過濾，濾液于25℃ 下減壓干燥，用甲醇 1mL溶解，0. 45μm 微孔濾膜過濾，分別配制好種子、枝條、葉和皮的樣品制備液。

操作步驟：

精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，依上述色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

附件：

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備注：

參考文獻(xiàn)：

李俊，牙啟康，蘇小建等.人工栽培南方紅豆杉紫杉醇的含量分析.廣西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版) .2005，23（2)：68～69

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