含黃芩制劑—小柴胡湯—黃芩苷的含量測定方法—HPLC-DAD-TOF/MS

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心藥學(xué)論壇

方法名稱：	含黃芩制劑—小柴胡湯—黃芩苷的含量測定—HPLC-DAD-TOF/MS
應(yīng)用范圍：	用于小柴胡湯中黃芩苷的含量測定。
方法原理：	本品用70%乙醇回流提取，經(jīng)液相色譜儀分離，按外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：	儀器設(shè)備 Agilent1100高效液相色譜儀；二極管陣列檢測器。色譜條件色譜柱：Agilent Zorbax XDB-C18，(2.1mm×50mm，1.8μm)；流動相：水(0.025%，A液)-甲醇（0.025%甲酸，B液)，梯度洗脫程序如下：0～1min：70%A～30%B;1～45min：25%A～75%B;45～55min：20%A～80%B;55～65min：100%B.流速：0.15ml/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量0.25μl，運(yùn)行時間：75min，離子源：APCIESI源，正離子方式監(jiān)測，用于定量分析的離子m/z803.4200～803.4900，干燥氣溫度：350℃，霧化氣壓力：275792Pa，霧化氣流速：10L/min，碰撞碎片電壓:200V。
試樣制備：	對照品溶液的配制分別精密稱取黃芩苷對照品13.65mg，置于10ml量瓶中用甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液。取儲備液各5.0ml于25ml量瓶中，經(jīng)稀釋，配成標(biāo)準(zhǔn)溶液，黃芩苷濃度為455.0，303.3，151.6，75.80，37.90，7.58，0.758μg/ml. 供試品溶液的制備分別取自制的小柴胡湯0.5g，精密稱定，置100ml平底燒瓶中，加70%乙醇，回流40min，放冷至室溫，過濾，收集濾液，重復(fù)提取3次，合并濾液，揮干，甲醇定容至10ml，進(jìn)樣前用0.22um濾膜過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液進(jìn)樣測定。
操作步驟：	精密吸取對照品及供試品溶10μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，以外標(biāo)法含量。
附件：	點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:m.quanxiangyun.cn)
備注：
參考文獻(xiàn)：	趙白云，朱臻宇。王彬等. HPLC-DAD-TOF/MS法測定小柴胡湯中柴胡皂苷a黃芩苷和甘草酸的含量.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào).2007.28（5)：527～530