方法名稱： |
復(fù)方板藍(lán)根顆粒--氨基酸含量測(cè)定-- HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
測(cè)定復(fù)方板藍(lán)根顆粒中氨基酸含量 |
方法原理： |
樣品加40%乙醇超聲提取，衍生化后經(jīng)液相色譜儀分離，在360 nm 處測(cè)定峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算氨基酸含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 大連依利特公司P200Ⅱ泵， UV200型紫外檢測(cè)器，Echrom 98色譜數(shù)據(jù)處理工作站； |
試樣制備： |
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密稱取精氨酸（Arg)和脯氨酸（Pro)對(duì)照品約10mg，置10mL量瓶中，用40%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即分別得Arg和Pro 對(duì)照品溶液。另精密稱取Arg和Pro對(duì)照品31.35mg和33.02mg，置25mL量瓶中，用40%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品混合溶液。精密吸取對(duì)照品混合溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mL，置10 mL量瓶中，加衍生緩沖液1.0mL，搖勻，加衍生溶液1.0mL，搖勻，避光，于 衍生緩沖溶液的制備 0.5 mol/L NaHCO3 (pH9)(即稱取NaHCO3 4.2g，加水溶解并定容至100mL)。 衍生溶液的制備 精密量取2,4-二硝基氟苯1mL至100mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度。 |
操作步驟： |
按上述方法，制備供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
萬(wàn)紹暉,徐玫,王荔等.反相高效液相色譜柱前衍生化法測(cè)定復(fù)方板藍(lán)根顆粒中氨基酸的含量.中藥材.2005,28(7):594-595 |
