方法名稱: |
輻花肋柱花—苦龍苷—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于輻花肋柱花中苦龍苷含量的測定 |
方法原理: |
本品粉末加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在254 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量。
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儀器設(shè)備及實(shí)驗條件: |
儀器 Agilent1100高效液相色譜儀(配置手動進(jìn)樣器、在線脫氣機(jī)、高壓二元梯度泵、恒溫柱溫箱、DAD檢測器、Agilent1100色譜工作站) 色譜條件 色譜柱:Kromasil-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:甲醇和水(含0.04 %磷酸),其比例為52∶48(體積比);流速:0.8 mL/min;檢測波長:254 nm;柱溫:30 ℃ |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精確稱取苦龍苷對照品2.2 mg溶于1 mL甲醇中,配制成2.2 mg/mL的儲備液,使用時稀釋成所需濃度。 供試品溶液制備 分別精確稱取粉碎至80目的樣品0.5 g,加入甲醇10 mL,超聲提取0.5 h,過濾,濾渣重復(fù)提取1次,合并濾液,定容至25 mL,過0.45 μm濾膜,取續(xù)濾液,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取苦龍苷對照液以及輻花肋柱花供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算苦龍苷含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
俞青芬,林鵬程.反相高效液相色譜法測定輻花肋柱花中苦龍苷含量的研究.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007. 35(4): 967~968 |