公開(公告)號 | CN1935841A |
公開(公告)日 | 2007.03.28 |
申請(專利)號 | CN200610015578.X |
申請日期 | 2006.09.04 |
專利名稱 | 抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY及其分離方法 |
主分類號 | C07K16/02(2006.01)I |
分類號 | C07K16/02(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 天津大學 |
發(fā)明(設計)人 | 孫淑清;馬向輝 |
地址 | 300072天津市南開區(qū)衛(wèi)津路92號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 |
代理人 | 陸 藝 |
國省代碼 | 天津;12 |
主權項 | 一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY,其特征是用下述方法分離制成: (1)動物免疫用乙肝病毒表面抗原HbsAg作為免疫原,對產蛋雞進行免疫,收集雞蛋于4℃儲存; (2)分離純化分離出雞卵黃,用6~9倍體積的去離子水稀釋,用0.1MHCl調節(jié)pH為4.5~5.5,加入氯化鈉至0.1~0.2M,4℃放置5~6小時,在3500轉/分下離心分離20~25分鐘,棄去沉淀,向上清液中加入硫酸鈉至質量百分濃度為18~20%,進行第一次鹽析,在3500轉/分,離心分離出蛋白質沉淀,沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,加入硫酸鈉至質量百分濃度為14~16%,進行第二次鹽析,離心分離,獲得的蛋白質沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,將此溶液用2.5×100cm Sephadex G-150凝膠柱過濾,過濾之前,凝膠柱用25mM pH=8的磷酸鹽緩沖液預平衡,洗脫液流速200ml/小時,洗脫出的蛋白質流分用紫外光度計監(jiān)測,吸收波長為280nm,收集第一條譜帶,用聚乙二醇反透析濃縮,再透析除鹽,得到一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY及其分離方法,分離方法是:(1)動物免疫;(2)分離純化分離出雞卵黃,用去離子水稀釋,調節(jié)pH,加氯化鈉放5~6小時,離心分離,棄去沉淀,向上清液中加入硫酸鈉進行第一次鹽析,離心分離出蛋白質沉淀,沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,加入硫酸鈉進行第二次鹽析,離心分離,獲得的蛋白質沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,用凝膠柱過濾,洗脫出的蛋白質流分用紫外光度計監(jiān)測,吸收波長為280nm,收集第一條譜帶,經反透析濃縮,再透析除鹽,得到一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY,本發(fā)明的分離方法,工藝簡單,成本低廉,所得樣品質量較好。 |
國際公布 |