一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團囊蟲草菌體的方法
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公開(公告)號
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CN1302101C
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公開(公告)日
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2007.02.28
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申請(專利)號
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CN200510050196.6
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申請日期
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2005.06.22
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專利名稱
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一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團囊蟲草菌體的方法
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主分類號
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C12N1/14(2006.01)I
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分類號
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C12N1/14(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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李永泉;鄭 靜
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地址
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310027浙江省杭州市玉古路20號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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杭州中成專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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唐銀益
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國省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項
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一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團囊蟲草菌體的方法，其特征在于，以人工分離培養(yǎng)到的大團囊蟲草純菌株(Cordycepsophioglossoides)為出發(fā)菌種，依次經(jīng)固體斜面培養(yǎng)，搖床種子培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)完成； 所述大團囊蟲草純菌株保藏號是CGMCC No.1146； 所述固體斜面培養(yǎng)的方法為：從保藏菌種接種到配制的斜面培養(yǎng)基上，溫度20～30℃，培養(yǎng)200～240小時；其中每1000毫升斜面培養(yǎng)基中包括：馬鈴薯100～300克、蔗糖或葡萄糖10～30克和瓊脂15～25克，培養(yǎng)基的pH值調(diào)為4.8～6.5； 所述搖床種子培養(yǎng)的方法為：菌種固體斜面培養(yǎng)200～240小時后，挑取菌絲體接種于裝有液體種子培養(yǎng)基的搖瓶中，在20～30℃培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速150～200rpm，培養(yǎng)60～72小時；其中每1000毫升種子培養(yǎng)基中包括：蔗糖20～60克、酵母粉或酵母膏10～50克、蛋白胨10～50克、MgSO4·7H2O0.1～0.5克和KH2PO40.1～0.5克； 所述發(fā)酵培養(yǎng)采用液體深層通氣發(fā)酵培養(yǎng)，其方法是：液體種子搖床培養(yǎng)60～72小時后接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，接種量5～15％(V/V)、保持罐溫20～30℃、罐壓0.4～0.8kg/cm，攪拌速率100～250rpm，通氣量1∶0.3～1∶1.2，發(fā)酵時間85～110小時；其中每1000毫升發(fā)酵培養(yǎng)基中包括：蔗糖50～100克、酵母粉或酵母膏10～60克，蛋白水解液20～100毫升、MgSO4·7H2O 0.2～1克和KH2PO4 0.2～1克，培養(yǎng)基的pH值調(diào)為4.8～6.5。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團囊蟲草菌體的方法，以大規(guī)模液體深層發(fā)酵培養(yǎng)大團囊蟲草菌體(Cordyceps ophioglossoides)為目標。以人工分離培養(yǎng)到的大團囊蟲草純菌株為出發(fā)菌種，經(jīng)斜面培養(yǎng)、搖瓶種子培養(yǎng)、最后到發(fā)酵罐培養(yǎng)，發(fā)酵液中的菌絲體以干重計可達2～3％的。本發(fā)明中公開的液體種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基分別由蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白胨、鎂鹽、鉀鹽和蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白水解液、鎂鹽、鉀鹽組成。兩種培養(yǎng)基分別適合液體種子階段培養(yǎng)和深層液體通氣培養(yǎng)大團囊蟲草菌，合理滿足了大團囊蟲草菌不同發(fā)酵時期所需的營養(yǎng)物質(zhì)，促進了菌體的生長和繁殖，提高了菌的活性。
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國際公布
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