公開(公告)號 | CN1287857C |
公開(公告)日 | 2006.12.06 |
申請(專利)號 | CN200410073124.9 |
申請日期 | 2004.09.29 |
專利名稱 | 胃癌特異性納米疫苗的制備方法 |
主分類號 | A61K39/00(2006.01)I |
分類號 | A61K39/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué) |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 吳開春;師 瑞;吳道澄;寧小萱;丁 杰;樊代明 |
地址 | 710032陜西省西安市長樂西路17號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 |
代理人 | 李鄭建 |
國省代碼 | 陜西;61 |
主權(quán)項 | 一種胃癌特異性納米疫苗的制備方法,其特征在于,將人工合成的胃癌特異性抗原MG7模擬表位多肽和免疫佐劑CpG ODN 1645采用納米乳劑包封,所述的胃癌特異性抗原MG7的氨基酸序列為Lys Pro His Val His Thr Lys,獲得胃癌特異性納米疫苗;具體包括以下步驟: 1)在2ml的雙蒸水中分別加入0.4%重量的司盤-80、吐溫-80;混合均勻得到水相A; 2)在另一加入8.0ml雙蒸水的大試管中,先加入1.6ml的大豆油,然后各加入1.6mg的胃癌特異性抗原MG7模擬表位多肽和免疫佐劑CpG ODN1645,最后加入0.4%重量的司盤-80,混合均勻,得到油相B; 3)在3000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柘,將油相B逐滴加入到水相A中,滴加完畢后將混合物移至真空高速剪切乳化機(jī)上,在0.7Kpa真空下,以23000轉(zhuǎn)/分剪切40分鐘,2次; 4)剪切后室溫冷卻20分鐘,得到乳白色帶乳光液體,冰浴下超聲3分鐘后再用膜過濾、除菌后4℃保存,即得到20nm-30nm的胃癌特異性納米疫苗。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了胃癌特異性納米疫苗的制備方法。本發(fā)明利用生物性納米乳劑作為體內(nèi)藥物運(yùn)輸載體,以胃癌特異性多肽抗原MG7為免疫抗原,以含有CpG基序的寡核甘酸(CpG ODN)為免疫佐劑,采用磁力超聲法構(gòu)建共包封有MG7-Ag模擬表位多肽與CpG ODN的納米疫苗。經(jīng)高效液相色譜分析,電鏡觀察以及離心等方法鑒定表明所構(gòu)建的納米疫苗粒徑控制在20-30nm并具有較高的包封率和穩(wěn)定性。疫苗免疫接種后,可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗MG7-Ag特異性抗體以及一定數(shù)量的特異性CTL分泌IFNγ,抗原-佐劑共包封組優(yōu)于單表位抗原單獨包封組和其他對照組。腫瘤攻擊后,共包封疫苗免疫組小鼠成瘤體積明顯小于對照組。這一基因疫苗在胃癌的免疫治療研究,胃癌特異性疫苗的研制方面將具有巨大的潛在價值。 |
國際公布 |