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重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的改進(jìn)方法

公開(公告)號(hào) CN1291015C  
公開(公告)日 2006.12.20  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200410098041.5  
申請(qǐng)日期 2004.12.02  
專利名稱 重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的改進(jìn)方法  
主分類號(hào) C12N9/12(2006.01)I  
分類號(hào) C12N9/12(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2003.12.2 EP 03027755.2  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 霍夫曼—拉羅奇有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 胡貝特·赫騰貝格爾;康拉德·霍諾爾德;克里斯蒂安·克萊因;彼得拉·呂格爾  
地址 瑞士巴塞爾  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司  
代理人 程金山  
國(guó)省代碼 瑞士;CH  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的方法,所述蛋白激酶選自由酸蛋白激酶和絲氨酸和蘇氨酸激酶組成的組,所述方法通過(guò)在微生物宿主細(xì)胞中表達(dá)編碼所述激酶的核酸,形成包含所述激酶的內(nèi)含體,分離,溶解,復(fù)性,和純化所述激酶來(lái)進(jìn)行,其特征在于所述純化是通過(guò)在至少70%所述正確折疊的蛋白激酶不結(jié)合所述吸附劑的條件下與疏水吸附劑進(jìn)行疏水相互作用而進(jìn)行和回收不結(jié)合所述吸附劑的蛋白激酶,其中所述條件的特征在于將所述激酶施加到包含至少0.1M KCl或NaCl的水溶液中的疏水吸附劑上,并且其中所述疏水吸附劑是固體或凝膠材料,其由用疏水殘基修飾的纖維素、交聯(lián)葡聚糖、交聯(lián)瓊脂糖組成。  
摘要 一種重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的方法,所述蛋白激酶選自由酪氨酸蛋白激酶和絲氨酸/蘇氨酸激酶組成的組,所述方法通過(guò)在微生物宿主細(xì)胞中表達(dá)編碼所述激酶的核酸,形成包含所述激酶的內(nèi)含體,分離,溶解,復(fù)性,和純化所述激酶來(lái)進(jìn)行,其特征在于所述純化是通過(guò)在至少70%所述蛋白激酶不結(jié)合所述吸附劑的條件下與疏水吸附劑進(jìn)行疏水相互作用而進(jìn)行和回收不結(jié)合所述吸附劑的蛋白激酶。  
國(guó)際公布  
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