| 公開(公告)號 | CN1710098A |
| 公開(公告)日 | 2005.12.21 |
| 申請(專利)號 | CN200410025199.X |
| 申請日期 | 2004.06.16 |
| 專利名稱 | 一種檢測拉米夫定耐藥HBV DNA的方法及試劑盒 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海復(fù)星醫(yī)學(xué)科技發(fā)展有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 何劍軍;周 煜;夏 懿 |
| 地址 | 200233上海市宜山路1289號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海光華專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 余明偉 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種檢測拉米夫定耐藥HBVDNA的方法，其特征在于使用以下多聚核苷酸：引物15’TGTATTCCCATCCCATCATCCT3’、引物25’ATGTTGTACAGATTTGGTCCC3’、引物35’TTGGCTTCCAGTACCACATCATC3’、引物45’CCCCAGTACCACATCATCA3’、引物55’CCCAGAACCACATCATCA3’、引物65’CCCAGTACCACATCATTCAC3’、引物75’CCCAGAACCACATCATTCAC3’、探針15’TCCTATGGGAGTGGGCCTCAG3’、探針25’CCATTTGTTCGGTGGTTCGTAG3’、探針35’ACCACATCATCAATATAACTGAAAGCC3’、或探針45’ACCACATCATCCACATAACTGAAAGC3’、或者與上述序列同源性大于75％的序列、或者上述所有序列的堿基互補(bǔ)序列，使用其中的任意一種或一種以上的組合。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種檢測HBV DNA的方法及其試劑盒，特別是涉及拉米夫定耐藥性的檢測。根據(jù)耐藥相關(guān)兩種主要的突變基因(YMDD突變?yōu)閅VDD和YIDD)設(shè)計特異性突變檢測引物和病毒特異性引物及公用的配套探針，或設(shè)計特異性突變檢測探針和病毒特異性檢測探針，分別在三個PCR管中通過相同的PCR程序?qū)ν粯颖具M(jìn)行實(shí)時熒光檢測。根據(jù)I反應(yīng)管、V反應(yīng)管檢測Ct值分別與C反應(yīng)管檢測Ct值的差值(ΔCt-i＝Ct-i-Ct-c，ΔCt-v＝Ct-v-Ct-c)，對臨床樣本中HBV病毒發(fā)生YVDD和YIDD耐藥突變情況進(jìn)行判斷。本發(fā)明的試劑盒性能穩(wěn)定、靈敏度高于測序，能更精確判斷耐藥和敏感病毒的共存比例關(guān)系，適用于對耐藥病毒和總病毒數(shù)量關(guān)系進(jìn)行半定量分析。 |
| 國際公布 |
