公開(kāi)(公告)號(hào)
|
CN1687413A
|
公開(kāi)(公告)日
|
2005.10.26
|
申請(qǐng)(專利)號(hào)
|
CN200510066193.1
|
申請(qǐng)日期
|
2005.04.21
|
專利名稱
|
重組人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子突變體及其制備方法
|
主分類號(hào)
|
C12N15/12
|
分類號(hào)
|
C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/435
|
分案原申請(qǐng)?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(qǐng)(專利權(quán))人
|
梁亮勝
|
發(fā)明(設(shè)計(jì))人
|
朱俊銘;雷繼軍;李清雄;王革非;余永恒;張曉林;張光勛;文 力
|
地址
|
430019湖北省武漢江岸區(qū)黃浦大街絲寶國(guó)際大廈
|
頒證日
|
|
國(guó)際申請(qǐng)
|
|
進(jìn)入國(guó)家日期
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
|
代理人
|
劉繼富;顧晉偉
|
國(guó)省代碼
|
湖北;42
|
主權(quán)項(xiàng)
|
一種制備hCNTF突變體的方法,包括下列步驟:(a)將hCNTF突變體基因序列克隆入表達(dá)載體以得到重組載體,并導(dǎo)入大腸桿菌中,生成含有重組載體的基因工程菌;(b)培養(yǎng)基因工程菌至OD600=12~14時(shí),加入乳糖,誘導(dǎo)hCNTF突變體在基因工程菌中可溶性表達(dá);(c)誘導(dǎo)后,向培養(yǎng)液中緩慢加入葡萄糖作為主要碳源,并控制培養(yǎng)液中溶解氧值為10%~15%,繼續(xù)培養(yǎng);(d)待基因工程菌的OD600=20-30時(shí),收獲菌體,并將菌體破碎得到破菌液;(e)純化破菌液,得到純化產(chǎn)品。
|
摘要
|
本發(fā)明涉及重組蛋白和其制備方法,具體涉及重組人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(簡(jiǎn)稱hCNTF)突變體及其制備方法,更具體的說(shuō),本發(fā)明涉及用乳糖誘導(dǎo)hCNTF突變體在大腸桿菌BL21(DE3)中高效可溶表達(dá)、并從中加以分離純化的方法,以及通過(guò)該方法制備的hCNTF突變體。
|
國(guó)際公布
|
|