用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素相關(guān)溶血素基因的檢測試劑
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公開(公告)號
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CN1637152A
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公開(公告)日
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2005.07.13
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申請(專利)號
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CN200410090525.5
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申請日期
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2004.09.03
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專利名稱
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用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素相關(guān)溶血素基因的檢測試劑
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2003.9.5 JP 314142/2003
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申請(專利權(quán))人
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東曹株式會社
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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益田升佳;堀江隆一;保川清
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地址
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日本山口縣
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京市中咨律師事務(wù)所
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代理人
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黃革生;隗永良
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國省代碼
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日本;JP
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主權(quán)項(xiàng)
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一種用于檢測樣品中存在的副溶血弧菌耐熱性溶血素相關(guān)溶血素(TRH)基因的檢測試劑，該檢測試劑被用于使用RNA擴(kuò)增程序的檢測方法中，所述RNA擴(kuò)增程序包括以下步驟：以一段來自所述TRH基因的RNA的特定序列作為模板，通過RNA依賴性DNA聚合酶，應(yīng)用具有與所述特定序列互補(bǔ)的序列的第一引物和具有與所述特定序列同源的序列的第二引物，生成cDNA，由此形成雙鏈RNA-DNA，其中第一引物或第二引物在其5’末端添加了RNA聚合酶的啟動子序列；通過核糖核酸酶H降解所述雙鏈RNA-DNA中的RNA部分，從而生成單鏈DNA；和以所述的單鏈DNA作為模板，通過DNA依賴性DNA聚合酶，合成具有所述啟動子序列的雙鏈DNA，其中所述雙鏈DNA能轉(zhuǎn)錄為由所述特定RNA序列或者所述特定RNA序列的互補(bǔ)序列組成的RNA；其中，該雙鏈DNA在RNA聚合酶的作用下生成RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，所述RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板用于隨后通過RNA依賴性DNA聚合酶合成cDNA；所述的試劑包括，第一引物，其是由SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸，或者是從SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個或多個核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列上的寡核苷酸；和第二引物，其是由SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸，或者是從SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個或多個核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列的互補(bǔ)序列上的寡核苷酸。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種檢測試劑，其用于在特異性擴(kuò)增TRH1和TRH2 RNA的擴(kuò)增程序中檢測耐熱性溶血素相關(guān)溶血素(TRH)基因，該試劑包括具有與來自TRH基因的RNA的特定序列互補(bǔ)的序列的第一引物，以及具有與所述特定序列同源的序列的第二引物。
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國際公布
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