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II型豬圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法及其應(yīng)用

公開(公告)號 CN1579553A  
公開(公告)日 2005.02.16  
申請(專利)號 CN200410018528.8  
申請日期 2004.05.18  
專利名稱 II型豬圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法及其應(yīng)用  
主分類號 A61K48/00  
分類號 A61K48/00;A61K39/12;A61P31/12  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 周繼勇;申會剛;郭軍慶  
地址 310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機構(gòu) 杭州求是專利事務(wù)所有限公司  
代理人 張法高  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項 一種豬II型圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法,其特征在于方法的步驟為:1)設(shè)計特異性引物,以PCV2杭州株(HZ0201)的基因組為模板,通過PCR的方法克隆PCV-2的ORF1、ORF2、ORF3和ORF4基因,與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體,以PCV2ORF1、ORF2、ORF3、ORF4基因作為PCV2核酸疫苗的基本組成部分;2)分離豬外周血單個核細(xì)胞,通過RT-PCR方法克隆豬IFN、IL-2和IL-4基因,并與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體,以豬IFN-γ、IL-2、IL-4基因作為基因佐劑;3)以上述重組載體為基礎(chǔ),分別構(gòu)建PCV2ORF2與PCV2的其它基因或與豬細(xì)胞因子基因的融合表達(dá)載體。  
摘要 本發(fā)明公開了一種II型豬圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法及其應(yīng)用。制備方法為:1)設(shè)計特異性引物,以PCV2杭州株(HZ0201)的基因組為模板,通過PCR的方法克隆PCV-2的ORF1、ORF2、ORF3和ORF4基因,與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體;2)分離豬外周血單個核細(xì)胞,通過RT-PCR方法克隆豬IFN、IL-2和IL-4基因,并與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體;3)以上述重組載體為基礎(chǔ),分別構(gòu)建PCV2 ORF2與PCV2的其它基因或與豬細(xì)胞因子基因的融合表達(dá)載體;本發(fā)明的優(yōu)點:(1)不需培養(yǎng)病毒,生產(chǎn)周期短;(2)不需細(xì)胞培養(yǎng),有效防止其它豬源病毒的污染;(3)不表達(dá)對機體有害的致病蛋白,安全性高;(4)可同時激活體液免疫與細(xì)胞免疫應(yīng)答。  
國際公布  
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