| 公開(公告)號 | CN1533436A |
| 公開(公告)日 | 2004.09.29 |
| 申請(專利)號 | CN03800140.3 |
| 申請日期 | 2003.01.14 |
| 專利名稱 | 通過同源重組用于基因斷裂的選擇細胞的快速方法 |
| 主分類號 | C12N15/11 |
| 分類號 | C12N15/11;C12N15/90 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2002.1.14 US 60/348,549 |
| 申請(專利權(quán))人 | 基因組生物科學(xué)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | R·M·小伯吉斯;P·A·施奈德 |
| 地址 | 美國加利福尼亞州 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | PCT/US2003/001260 2003.1.14 |
| 進入國家日期 | 2003.10.10 |
| 專利代理機構(gòu) | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 趙蓉民 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項 | 一種鑒定轉(zhuǎn)化細胞的方法，該轉(zhuǎn)化細胞經(jīng)過利用AMFP載體進行了位點特異性同源重組，所述的方法包含：a)設(shè)計用AMFP載體轉(zhuǎn)化的細胞以進行位點特異的同源/重組，其中所述的載體包括：實質(zhì)上與宿主基因組的內(nèi)源基因組序列同源的第一DNA序列；第二DNA序列，該序列編碼在所述細胞中編碼特征性缺乏調(diào)節(jié)因子和編碼初始蛋氨酸的序列的熒光蛋白選擇，并且與細胞內(nèi)源性基因組序列非同源，因此不能進行位點特異性同源重組。實質(zhì)上與宿主基因組的內(nèi)源基因組序列同源，并且與第一DNA序列不同的第三DNA序列；b)通過選擇存在所述第二DNA序列的功能性熒光蛋白可選擇標(biāo)記的基因產(chǎn)物，繁殖細胞以選擇或富集那些用所述AMFP載體轉(zhuǎn)化的細胞。c)從沒有所述第二DNA序列的細胞中分離具有所述編碼功能性熒光蛋白可選擇標(biāo)記的第二DNA序列的細胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了用于真核細胞特別基因組位點的特異性改變的方法和載體。一種方法包含利用負-ATG(ATG-minus)熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)基因靶向(AMFP)DNA載體，目的是為了產(chǎn)生和鑒別經(jīng)過位點特異性同源重組把載體序列整合進宿主細胞基因組的細胞。該方法也包含利用編碼體內(nèi)可發(fā)現(xiàn)標(biāo)記的序列，鑒別經(jīng)過位點特異性同源重組或是非同源重組或是插入而把外源載體序列整合進了宿主細胞的基因組的細胞。本發(fā)明也包括在真核細胞內(nèi)產(chǎn)生修飾的載體。另外，本發(fā)明包括通過實施和使用提供的方法和載體，從具備特異性遺傳改變的細胞生成的細胞和有機體。 |
| 國際公布 | WO2003/060087 英 2003.7.24 |
