公開(公告)號
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CN1545553A
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公開(公告)日
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2004.11.10
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申請(專利)號
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CN02805619.1
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申請日期
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2002.02.01
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專利名稱
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生產(chǎn)重組胰蛋白酶的方法
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主分類號
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C12N15/57
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分類號
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C12N15/57;C12N9/76;C12N1/19
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2001.2.1 EP 01102342.1
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申請(專利權(quán))人
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弗·哈夫曼-拉羅切有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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R·米勒;S·格萊澤;F·蓋佩爾;J-P·塔爾霍費(fèi)爾;B·雷克塞爾;C·施奈德;M·拉特卡;S·倫寧;H·埃克施泰因;C·吉塞爾
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地址
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瑞士巴塞爾
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頒證日
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國際申請
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PCT/EP2002/001072 2002.2.1
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進(jìn)入國家日期
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2003.08.27
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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吳亦華
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國省代碼
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瑞士;CH
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主權(quán)項(xiàng)
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重組生產(chǎn)胰蛋白酶的方法,該方法包含步驟:a)用重組核酸轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞,該核酸編碼一種由宿主可分泌的形式的前肽序列中具有腸激酶識別位點(diǎn)的胰蛋白酶原,b)在一定條件下培養(yǎng)宿主細(xì)胞,該條件使得重組核酸能夠表達(dá)且表達(dá)產(chǎn)物能夠分泌到培養(yǎng)基中,該條件是為了基本防止前肽序列的自身催化性切割而選擇的,c)從培養(yǎng)基中分離表達(dá)產(chǎn)物,d)切割前肽序列以形成活性胰蛋白酶且e)從活性胰蛋白酶中可選擇地分離未切割的胰蛋白酶原分子。
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摘要
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本發(fā)明涉及生產(chǎn)來自豬胰的重組胰蛋白酶的方法,該胰蛋白酶在巴斯德畢氏酵母(Pichia pastoris)中是可溶的且分泌到培養(yǎng)基中,其中在pH 3.0-4.0的表達(dá)防止了胰蛋白酶原到β胰蛋白酶的活化和β胰蛋白酶由胰蛋白酶自溶為ε胰蛋白酶及由此變?yōu)槭Щ畹碾摹?
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國際公布
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WO2002/061064 德 2002.8.8
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