公開(公告)號
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CN1544636A
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公開(公告)日
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2004.11.10
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申請(專利)號
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CN200310106354.6
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申請日期
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2003.11.19
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專利名稱
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抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備與鑒定方法
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主分類號
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C12N15/53
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分類號
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C12N15/53;C12P21/08;G01N33/577
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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東南大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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謝維;金俊飛;張建瓊;單軍
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地址
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210096江蘇省南京市四牌樓2號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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沈廉
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項
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一種抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備方法,其特征在于采用基因重組的方法表達(dá)醛糖還原酶相似蛋白-谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(ARL-GST)重組蛋白并將其純化;將醛糖還原酶相似蛋白-谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(ARL-GST)免疫小鼠制備脾細(xì)胞懸液,在聚乙二醇(PEG)作用下與處于對數(shù)生長期的Sp2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,經(jīng)過雜交瘤抗體檢測與數(shù)次克隆,得到穩(wěn)定分泌抗ARL-1單克隆抗體的一株細(xì)胞。
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摘要
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抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備與鑒定方法,屬于生物工程開發(fā)新型肝癌診斷試劑的技術(shù)領(lǐng)域。其制備的方法是采用基因重組的方法表達(dá)、純化ARL-GST重組蛋白,將ARL-GST免疫小鼠制備脾細(xì)胞懸液,在聚乙二醇作用下與處于對數(shù)生長期的Sp2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,經(jīng)過雜交瘤抗體檢測與數(shù)次克隆,得到穩(wěn)定分泌抗ARL-1單克隆抗體的一株細(xì)胞,命名為F9。經(jīng)測定F9分泌的抗ARL-1單克隆抗體屬IgG2b亞型,輕鏈為κ型,其腹水效價為1∶4×10-5。經(jīng)鑒定F9分泌的單克隆抗體只對ARL-1蛋白反應(yīng),而對與ARL-1蛋白具有較高同源性的醛糖還原酶都不起作用,說明上述單克隆抗體是特異性抗ARL-1蛋白的。
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國際公布
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