| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1151173C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2004.05.26 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) | CN02136033.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2002.07.12 |
| 專(zhuān)利名稱(chēng) | 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的生產(chǎn)方法 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C07K14/435 |
| 分類(lèi)號(hào) | C07K14/435;C07K14/48;C12P21/02;C12N15/12 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 杭州九源基因工程有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 黃巖山;王昌梅;裘霽宛;李輝 |
| 地址 | 310018 浙江省杭州市下沙經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)8號(hào)大街東 |
| 頒證日 | 2004.05.26 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) | 杭州求是專(zhuān)利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 張法高 |
| 國(guó)省代碼 | 浙江;33 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的生產(chǎn)方法，其特征在于通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)，對(duì)人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的基因進(jìn)行修飾改造，獲得如圖1所示的改造后突變?nèi)私逘钌窠?jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因的cDNA，人工合成該cDNA，構(gòu)建重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，經(jīng)全自動(dòng)發(fā)酵罐高密度表達(dá)；以切向流超濾方式進(jìn)行復(fù)性；以離子交換層析、疏水層析和分子篩層析順序組合純化，生產(chǎn)得到高純度的睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的生產(chǎn)方法。它通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)，對(duì)人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的基因進(jìn)行修飾改造，獲得改造后突變?nèi)私逘钌窠?jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因的cDNA，人工合成該cDNA，構(gòu)建重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，經(jīng)全自動(dòng)發(fā)酵罐高密度表達(dá)；以切向流超濾方式進(jìn)行復(fù)性；以離子交換層析、疏水層析和分子篩層析順序組合純化，生產(chǎn)得到高純度的睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：1)采用計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)，對(duì)天然密碼子進(jìn)行了優(yōu)化，實(shí)現(xiàn)了突變體在大腸桿菌中的穩(wěn)定高表達(dá)。2)采用切向流超濾方式復(fù)性，可減少超濾過(guò)程中的極化現(xiàn)象。3)離子交換層析、疏水層析和分子篩層析三種不同分離機(jī)理層析順序組合，使復(fù)性后的CNTF得以純化精制，其純度均大于95％。 |
| 國(guó)際公布 |
