公開(公告)號(hào)
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CN1146666C
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公開(公告)日
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2004.04.21
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申請(專利)號(hào)
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CN98810394.X
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申請日期
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1998.10.20
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專利名稱
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同源重組中的正負(fù)篩選
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主分類號(hào)
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C12N15/90
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分類號(hào)
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C12N15/90;C12N15/65;C12N15/82
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1997.10.20 EP 97118175.5
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申請(專利權(quán))人
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羅切診斷學(xué)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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J·奧爾;R·斯賓杰;K·霍諾德
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地址
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德國曼海姆
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頒證日
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2004.04.21
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國際申請
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PCT/EP1998/006616 1998.10.20
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進(jìn)入國家日期
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2000.04.20
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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樊衛(wèi)民
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國省代碼
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德國;DE
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主權(quán)項(xiàng)
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一種通過同源重組將異源DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞的方法,其中宿主細(xì)胞用含有兩個(gè)側(cè)翼核苷酸序列的重組載體轉(zhuǎn)染,所述側(cè)翼核苷酸序列與宿主細(xì)胞基因組中的目標(biāo)序列同源,且編碼正選擇標(biāo)記的核苷酸位于兩個(gè)側(cè)翼核苷酸序列內(nèi)側(cè),編碼負(fù)選擇標(biāo)記的核苷酸序列位于兩個(gè)側(cè)翼核苷酸序列外側(cè),選擇標(biāo)記基因與在宿主細(xì)胞中有活性的表達(dá)控制序列有效連接,其中使用一種或多種編碼位于細(xì)胞表面多肽的核苷酸序列作為負(fù)選擇標(biāo)記,使得在載體通過同源重組整合入細(xì)胞基因組后負(fù)選擇基因不表達(dá),在載體通過隨機(jī)整合入細(xì)胞基因組后負(fù)選擇基因表達(dá),且其基因產(chǎn)物出現(xiàn)在細(xì)胞表面。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種通過同源重組向目標(biāo)細(xì)胞基因組中導(dǎo)入異源DNA的方法。本發(fā)明還涉及適于同源重組的DNA構(gòu)建體。
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國際公布
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WO99/20780 德 1999.4.29
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