| 公開(公告)號(hào) | CN1137998C |
| 公開(公告)日 | 2004.02.11 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN01108278.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2001.02.28 |
| 專利名稱 | 酶解法生產(chǎn)肝素鈉 |
| 主分類號(hào) | C12P19/04 |
| 分類號(hào) | C12P19/04 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 灌云縣金瑞生物制品有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 樊永金 |
| 地址 | 222200 江蘇省灌云縣伊山鎮(zhèn)伊東片鄧莊工業(yè)園區(qū) |
| 頒證日 | 2004.02.11 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 |
| 代理人 | 沈;兵 |
| 國(guó)省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種生物催化法生產(chǎn)肝素鈉的方法，其特征在于所采用的催化劑為2709蛋白酶，且生產(chǎn)過程依次包括以下幾個(gè)步驟：(1)按照1∶2.3-4重量比向豬小腸粘膜中加入水，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至9-10，升溫至50-55℃，并按每公斤小腸1.5克的比例加入2709蛋白酶，保溫?cái)嚢?5分鐘后，按豬小腸粘膜重量每公斤加入0.12-0.15千克粗鹽，升溫至60-70℃；(2)催化反應(yīng)產(chǎn)物用150-180目棉布篩過濾，分離除去雜質(zhì)蛋白質(zhì)，得到過濾液；(3)在每公斤豬小腸粘膜獲得的濾液中加入0.1-0.13公斤D204強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂，反應(yīng)2-3小時(shí)，分離母液得到離子交換后的樹脂；(4)以完全浸沒離子交換后的樹脂為量，分別用濃度為每升0.04-0.06摩爾的氯化鈉、每升0.4-0.6摩爾的氯化鈉溶液洗滌攪拌15-20分鐘，分離母液，得到洗滌后的樹脂；(5)分兩次以完全浸沒洗滌后的樹脂為量，加入每升3-4摩爾的氯化鈉反應(yīng)20-30分鐘，分離樹脂，收集合并兩次反應(yīng)液體產(chǎn)物；(6)用每升2摩爾的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)上述反應(yīng)液體產(chǎn)物的pH值至11-12，升溫至60-80℃，用150-180目多層棉布篩過濾，濾液在攪拌下加入重量濃度為85-95％的乙醇，調(diào)節(jié)液體比重為乙醇比重計(jì)計(jì)量35-45度，室溫下靜置2-4小時(shí)，分離液體，得到沉淀物；(7)按重量比1∶2比例，將沉淀物用重量濃度95-99％的乙醇脫水2-3次，60-80℃溫度下干燥即得肝素鈉。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種利用生物發(fā)酵工藝生產(chǎn)肝素鈉的方法。該方法采用2709蛋白酶作為催化劑，D204強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂作為離子交換樹脂，并采用150-180目多層布篩進(jìn)行過濾，有效克服了原生產(chǎn)工藝生產(chǎn)周期長(zhǎng)、水解不完全、收率低、所得產(chǎn)品純度低、產(chǎn)生的廢水嚴(yán)重污染環(huán)境等缺陷，采用此工藝生產(chǎn)1億國(guó)際單位肝素鈉只需豬小腸粘膜1800-2000根，產(chǎn)品純度達(dá)80效價(jià)/毫克以上。 |
| 國(guó)際公布 |
