| 公開(公告)號 | CN1432408A |
| 公開(公告)日 | 2003.07.30 |
| 申請(專利)號 | CN02102302.6 |
| 申請日期 | 2002.01.15 |
| 專利名稱 | 牛乳腺炎疫苗的制備方法 |
| 主分類號 | A61K39/02 |
| 分類號 | A61K39/02;A61K39/108;A61P31/04 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 恒信環(huán)球農(nóng)業(yè)科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 詹古拉 |
| 地址 | 美國加利福尼亞洲 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京集佳專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 王學(xué)強(qiáng) |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種制備牛乳腺炎疫苗的方法，包括如下步驟：a.提取含有蔗糖-6果糖轉(zhuǎn)移酶(sacB)基因的質(zhì)粒；b.制備革蘭氏陰性菌感受態(tài)細(xì)胞；c.轉(zhuǎn)化步驟a中提取含有的蔗糖-6果糖轉(zhuǎn)移酶(sacB)基因的質(zhì)粒進(jìn)入步驟b所制備的革蘭氏陰性菌感受態(tài)細(xì)胞中；d.鑒定，獲得轉(zhuǎn)化的革蘭氏陰性菌；e.已轉(zhuǎn)化的革蘭氏陰性菌在細(xì)菌培養(yǎng)基中生長直到濃度達(dá)到105-1012CFU/ml；f.收集步驟e中的已轉(zhuǎn)化的革蘭氏陰性菌，室溫，400g，離心20分鐘；g.棄上清液，用1-10％(體積比)的蔗糖和清洗物質(zhì)清洗疫苗，重懸浮，在37℃下，混合20分鐘，誘導(dǎo)自殺性蔗糖-6果糖轉(zhuǎn)移酶(sacB)基因表達(dá)，混合物在400g，4℃下再次離心，棄上清液；h.重復(fù)步驟g兩次；i.疫苗在清洗物質(zhì)中被懸浮，按佐劑和疫苗體積比為3∶2的比例加入佐劑，使疫苗每一次免疫量的濃度為8.0×105CFU或以上。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種牛乳腺炎疫苗的制備方法。本發(fā)明提供了利用含有核心通用抗原的革蘭氏陰性菌，通過含有蔗糖-6果糖轉(zhuǎn)移酶(sacB)基因質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化，在蔗糖的誘導(dǎo)下，使革蘭氏陰性菌自殺，收集這些含有核心通用抗原的革蘭氏陰性菌，制備牛乳腺炎的疫苗的方法。本發(fā)明牛乳腺炎疫苗的制備方法不會(huì)對疫苗的免疫原性造成損害，不會(huì)產(chǎn)生替代的或非天然的疫苗抗原，所用的化學(xué)誘導(dǎo)物質(zhì)是食用的無毒的蔗糖。同時(shí)可以大大減少疫苗中的內(nèi)毒素，減少副作用，刺激免疫系統(tǒng)抵御全部的大腸桿菌，沙門氏菌等革蘭氏陰性菌所引起的牛乳腺炎。 |
| 國際公布 |
