| 公開(公告)號 | CN1330665C |
| 公開(公告)日 | 2007.08.08 |
| 申請(專利)號 | CN200510112235.0 |
| 申請日期 | 2005.12.29 |
| 專利名稱 | 海龍抗腫瘤活性蛋白 |
| 主分類號 | C07K14/435(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/435(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海交通大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李曉波;張朝暉;秦孫星;王 威;王夢月 |
| 地址 | 200240上海市閔行區(qū)東川路800號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海交達(dá)專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 王錫麟;王桂忠 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種海龍抗腫瘤活性蛋白，其特征在于，以粗吻海龍為原料提取的分子量為55kDa的活性蛋白，其中，蛋白質(zhì)含量在99-100％之間，糖含量在0-1％之間，通過以下方式獲得： (1)以粗吻海龍為原料，粉碎后過篩，待用； (2)在粗吻海龍粗粉中加入4～12倍量的體積百分比為0～90％的乙醇-水溶液，勻漿、低溫浸泡，離心后取上清液，即為海龍蛋白粗提液； (3)將蛋白粗提液于20～60℃減壓蒸發(fā)濃縮后，與HZ-801大孔樹脂接觸，充分吸附后用蒸餾水洗脫，收集蛋白組分，得到海龍蛋白分離液； (4)將海龍蛋白分離液減壓蒸發(fā)濃縮，加入硫酸銨粉末使硫酸銨濃度達(dá)到20％-90％飽和度，充分?jǐn)嚢韬?℃靜置，離心，收集沉淀，將沉淀用少量Tris-HCl緩沖液溶解后透析、濃縮、冷凍干燥，即得到海龍粗蛋白； (5)將海龍粗蛋白用pH7.2、20mM Tris-HCl緩沖液溶解后，與凝膠過濾介質(zhì)接觸，用pH7.2、20mM Tris-HCl緩沖液洗脫，收集分子量在10-100kDa的蛋白質(zhì)洗脫液，透析、濃縮、冷凍干燥后，經(jīng)體外抗腫瘤活性檢測，獲得海龍抗腫瘤粗蛋白； (6)將海龍抗腫瘤粗蛋白用pH8.4、20mM Tris-HCl緩沖液溶解，與離子交換介質(zhì)接觸，梯度NaCl緩沖液洗脫，得到數(shù)個(gè)不同濃度NaCl緩沖液的洗脫組分，0.5M NaCl洗脫峰經(jīng)透析、濃縮、凍干后即為所述的海龍抗腫瘤活性蛋白。 |
| 摘要 | 一種醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域的海龍抗腫瘤活性蛋白，以粗吻海龍為原料提取的分子量為55kDa的活性蛋白，其中，蛋白質(zhì)含量在99-100％之間，糖含量在0-1％之間，其外觀為白色粉末，SDS-PAGE顯示是單一條帶。本發(fā)明所提供的海龍抗腫瘤活性蛋白，具有抗腫瘤活性，同時(shí)有低毒、增強(qiáng)免疫的特點(diǎn)。本發(fā)明單獨(dú)或與其它藥物聯(lián)合使用均有抗腫瘤作用，主要用于各種癌癥的治療和輔助治療，如：肺癌、肝癌、宮頸癌、結(jié)腸癌、白血病等，尤其對A-549、Bel-7402、Hela、Lovo、P-388細(xì)胞株有較強(qiáng)殺傷作用；同時(shí)還具有增強(qiáng)免疫的作用。 |
| 國際公布 |
