公開(公告)號
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CN101130763A
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公開(公告)日
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2008.02.27
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申請(專利)號
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CN200710143210.6
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申請日期
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2007.08.08
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專利名稱
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銀杏愈傷組織或懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法
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主分類號
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C12N5/04(2006.01)I
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分類號
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C12N5/04(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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南京林業(yè)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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曹福亮;陳 穎;胡春宏
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地址
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210037江蘇省南京龍蟠路159號南京林業(yè)大學(xué)環(huán)境學(xué)院
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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北京元本知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
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代理人
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葉 凡
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項
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一種銀杏愈傷組織或銀杏懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,包括無菌葉源的獲得、愈傷組織誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)等步驟,其主要步驟如下: (1)、按照常規(guī)植物組織培養(yǎng)的芽或葉片增殖的方法,獲得無菌的銀杏芽苗或葉片; (2)、將步驟(1)所獲得的銀杏無菌芽苗或葉片接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),初代培養(yǎng)后連續(xù)繼代5~6次,獲得松散的銀杏愈傷組織; (3)、將步驟(2)所獲得的銀杏愈傷組織接種在含有NAA和KT的MS液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng),繼代培養(yǎng)2次,得液體懸浮培養(yǎng)細(xì)胞; (4)、將步驟(3)所得到的液體懸浮培養(yǎng)細(xì)胞接種在下述任意一種液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng):(a)MS液體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+稀土0.5~5mg/L,或(b)MS液體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+水楊酸0.5~5mg/L;收集細(xì)胞培養(yǎng)物,得銀杏懸浮細(xì)胞;或?qū)⒉襟E(2)中所獲得的銀杏愈傷組織繼代在下述任意一種固體培養(yǎng)基上培養(yǎng):(a)MS固體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+稀土0.5~5mg/L,或(b)MS固體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+水楊酸0.5~5mg/L,收獲愈傷組織培養(yǎng)物,得銀杏愈傷組織。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種銀杏愈傷組織或懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,包括無菌葉源的獲得、愈傷組織誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、愈傷組織或懸浮細(xì)胞中產(chǎn)生黃酮類化合物等步驟,本發(fā)明方法所制備的銀杏愈傷組織或懸浮細(xì)胞中有較高含量的銀杏黃酮類化合物。本發(fā)明方法利用稀土、水楊酸等誘導(dǎo)子對銀杏愈傷組織或懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)和黃酮的生產(chǎn)進(jìn)行有目的的調(diào)控,可以在短期內(nèi)獲得大量的制藥原料,并能有效降低生產(chǎn)成本。
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國際公布
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