蛋種雞場(chǎng)雞白痢檢測(cè)方法與凈化程序
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雞白痢是由雞白痢沙門(mén)氏菌（Salmonella pullorum, SP)引起的細(xì)菌性疾病，本病既可水平傳播，又可通過(guò)種蛋垂直傳染，是危害養(yǎng)雞業(yè)最嚴(yán)重的疾病之一，本文就大型蛋種雞場(chǎng)對(duì)此病實(shí)施的檢測(cè)方法和凈化措施進(jìn)行了綜述。1 雞白痢檢測(cè)方法 在規(guī)模化蛋種雞場(chǎng)中最常選用的是平板凝集試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行大規(guī)模雞群的檢測(cè)，以實(shí)施凈化。1.1 全血平板凝集試驗(yàn) 操作方法為用微量移液器吸取30μL雞白痢抗原，滴在潔凈的普通玻璃板或陶瓷板上，用注射器針頭刺破被檢雞只翅膀內(nèi)側(cè)的靜脈血管，每只雞更換1個(gè)針頭，用微量移液器吸取30μL流出的血液，與抗原充分混合，隨即涂展成直徑為1.5～2cm的圓形混合液，搖晃玻板，并隨時(shí)觀察凝集反應(yīng)。1.2 血清平板凝集試驗(yàn) 首先采集待檢雞只全血樣本，將血樣置于塑料離心管內(nèi)，并記錄對(duì)應(yīng)雞只編號(hào)，待血清自然析出后，吸取血清，進(jìn)行血清平板凝集試驗(yàn)。1.3 結(jié)果判斷 檢測(cè)前，需進(jìn)行抗原對(duì)照試驗(yàn)，取30μL抗原，與等體積標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)陽(yáng)性血清、弱陽(yáng)性血清、陰性血清按等體積混合，在2～3分鐘內(nèi)，強(qiáng)陽(yáng)性血清出現(xiàn)100%凝集（++++)；弱陽(yáng)性血清出現(xiàn)50%（++)；陰性血清不凝集（-)，方可進(jìn)行檢測(cè)。 抗原與待檢樣品混合后2～3分鐘，判定結(jié)果，有50%（++)以上凝集為陽(yáng)性，不發(fā)生凝集為陰性。1.4 注意事項(xiàng) 全血平板凝集試驗(yàn)，操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)速度快，可在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行，在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用最為廣泛。但由于受雞舍內(nèi)環(huán)境、光線、溫度等條件影響，致使檢測(cè)結(jié)果存在一定假陽(yáng)性的比例。此外，該方法靈敏度有一定的局限性，只能檢測(cè)到抗體滴度較高的帶菌雞，因此常存在漏檢現(xiàn)象。而血清中抗體含量較高，因此血清平板凝集較全血平板凝集特異性強(qiáng)、敏感性高、檢出陽(yáng)性率高。但操作相對(duì)復(fù)雜，且需要對(duì)待檢雞只進(jìn)行編號(hào)，因此，該方法適用于核心雞群凈化檢疫。 檢測(cè)用抗原應(yīng)置于2-8℃冷暗處保存，回復(fù)到室溫后方可檢測(cè)，使用過(guò)程中要保持抗原處于懸浮液狀態(tài)，檢測(cè)需在20～30℃的環(huán)境中進(jìn)行。抗原與待檢血清或全血需等體積混合，反應(yīng)時(shí)間控制在2～3分鐘內(nèi)，不得任意延長(zhǎng)或縮短。待檢血清或全血不應(yīng)有細(xì)菌污染。玻板必須光滑、洗凈，否則影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2 凈化程序 通過(guò)檢測(cè)淘汰陽(yáng)性雞只是凈化工作的核心，因此，科學(xué)、嚴(yán)格的檢測(cè)程序是實(shí)現(xiàn)凈化的重要保障。根據(jù)白痢桿菌陽(yáng)性
雞血清抗體消長(zhǎng)規(guī)律，種雞的首次最適檢疫時(shí)間為120～140日齡，即開(kāi)產(chǎn)前。此時(shí)種雞處于性成熟階段，血檢時(shí)反應(yīng)速度快，檢出率高，并且在生產(chǎn)種蛋前進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)確保種蛋無(wú)白痢桿菌感染十分重要。然而，根據(jù)雞白痢的血清學(xué)特點(diǎn)，僅靠1次檢疫是遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到凈化效果的，必須通過(guò)兩次，甚至多次檢測(cè)將處于不同感染時(shí)期的帶菌雞徹底檢出并淘汰。2.1 曾祖代雞群凈化程序 在產(chǎn)蛋率達(dá)10%、繼代前2次檢疫。采用血清平板凝集的方法，在雞群產(chǎn)蛋率達(dá)10%時(shí)首次普檢。如果有陽(yáng)性雞檢出，則在1個(gè)月后進(jìn)行第二次普檢，直至無(wú)陽(yáng)性雞檢出；如果無(wú)陽(yáng)性雞檢出，則以后每月公雞普測(cè)，母雞每季度抽測(cè)一次，每次抽測(cè)5～10%，超標(biāo)時(shí)普檢。繼代前進(jìn)行第二次普檢。每次檢出的陽(yáng)性雞必須立即淘汰，并對(duì)環(huán)境、籠具等徹底消毒。2.2 祖代雞群凈化程序 雞群產(chǎn)蛋率達(dá)10%時(shí)普檢。如果雞群陽(yáng)性率超標(biāo)（1‰)，每月普檢一次，直至達(dá)標(biāo)后停止普檢；如果首次檢測(cè)時(shí)陽(yáng)性率不超標(biāo)，以后每月公雞普測(cè)，母雞每季度抽測(cè)1次，每次抽測(cè)5～10%，超標(biāo)時(shí)普檢。每次檢出的陽(yáng)性雞必須立即淘汰，并對(duì)環(huán)境、籠具等徹底消毒。2.3 父母代雞群凈化程序 雞群產(chǎn)蛋率達(dá)10%時(shí)普檢。如果雞群陽(yáng)性率超標(biāo)（2‰)，35周齡第二次普檢。如果首次檢測(cè)時(shí)陽(yáng)性率低于以上標(biāo)準(zhǔn)，以后每月公雞普測(cè)，母雞每季度抽測(cè)1次，每次抽測(cè)5～10%，超標(biāo)時(shí)普檢。每次檢出的陽(yáng)性雞必須立即淘汰，并對(duì)環(huán)境、籠具等徹底消毒。
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