細菌和紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合后,可出現肉眼可見的凝集(agglutination)現象。早在1896年,Widal就利用傷寒病人的血清與傷www.med126.com寒桿菌發(fā)生特異性凝集的現象,有效地診斷傷寒病。至1900年Landsteriner在特異性血凝現象的基礎上發(fā)現了人類血型,并于1930年獲得了諾貝爾獎金。凝集試驗靈敏度高,方法簡便,迄今已成為通用的免疫學試驗,廣泛應用于臨床檢驗。
凝集反應的發(fā)生分兩階段:①抗原抗體的特異結合;②出現可見的顆粒凝集。通常,細菌和紅細胞等顆?乖趹乙褐袔踟撾姾,周圍吸引一層與之牢固結合的正離子,外面又排列一層松散的負離子層,構成一個雙層離子云。在松散層內界和外界之間的電位差形成Z電位。溶液中的離子強度愈大,Z電位也就愈大。Z電位使顆粒相互排斥。當特異抗體與相應抗原顆粒互補結合時,抗體的交聯作用克服了抗原顆粒表面的Z電位,而使顆粒聚集在一起。但當抗體分子太少,不足以克服相當厚度的離子云層時,則不能使顆粒聚集。因此在凝集反應中,IgM類抗體的作用比IgG類抗體要大數百倍,所以IgG類抗體常出現不完全反應,m.quanxiangyun.cn/zhuyuan/即不可見的抗原抗體反應。這種抗體有時又稱不完全抗體。不完全的含義是:可與抗原牢固結合,但因其分子量較小,不能起到由橋聯作用而形成的可見凝集現象。在試驗過程中,為促使凝集現象的出現,可采取以下措施:增加蛋白質或電解質,降低溶液中離子強度以縮短顆粒間的距離;增加試液的粘滯度,如加入右旋糖酐或葡聚糖等;用胰酶或神經氨酸酶處理,改變細胞的表面化學結構;以離心方法克服顆粒間的排斥等。
凝集試驗是一個定性的檢測方法,即根據凝集現象的出現與否判定結果陽性或陰性;也可以進行半定量檢測,即將標本作一系列對倍稀釋后進行反應,以出現陽性反應的最高稀釋度作為滴度。由于凝集反應方法簡便,敏感度高,因而在臨床檢驗中被廣泛應用。
在免疫學技術中,凝集反應可分為直接凝集反應和間接凝集反應兩大類。自身紅細胞凝集試驗和抗球蛋白參與的凝集試驗是兩種特殊的凝集反應。