己烯雌酚片－己烯雌酚－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定己烯雌酚片中己烯雌酚的含量。

本方法適用于己烯雌酚片。

供試品經(jīng)乙醇-水（1：1)溶解并定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測己烯雌酚的峰面積，計(jì)算出其含量。

1 甲醇

2. 乙醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按己烯雌酚反式體峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 水=80 20

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取己烯雌酚對(duì)照品適量，加乙醇-水（1：1)溶解并定量稀釋制成每1mL中約含己烯雌酚0.1mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量，加乙醇-水（1：1)適量，超聲處理使己烯雌酚溶解，并定量稀釋制成每1mL中約含己烯雌酚0.1mg的溶液，濾過，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長254nm處測定，按外標(biāo)法以己烯雌酚順式體峰面積的1.26倍與己烯雌酚反式體峰面積的和計(jì)算出含量。