硝酸毛果蕓香堿滴眼液—硝酸毛果蕓香堿的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定硝酸毛果蕓香堿滴眼液中硝酸毛果蕓香堿（C₁₁H₁₆N₂O₂·HNO₃)的含量。

本方法適用于硝酸毛果蕓香堿滴眼液中硝酸毛果蕓香堿的含量測(cè)定。

取本品適量，置于50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，置50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取硝酸毛果蕓香堿對(duì)照品適量，精密稱定，同法測(cè)定。按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

1. 甲醇

2. 稀醋酸

3. 醋酸鈉

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按硝酸毛果蕓香堿峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇＋水溶液（含2.94g醋酸鈉和38.4mL稀醋酸)= 400 600

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm

2.3 柱溫：室溫

1.稀醋酸

取冰醋酸60mL，加水稀釋至1000mL，即得。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取硝酸毛果蕓香堿對(duì)照品50mg，置于50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，為對(duì)照品溶液。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

精密量取苯甲酸，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1mL中含90μg的溶液，搖勻，為內(nèi)標(biāo)溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密稱取本品適量（約相當(dāng)于硝酸毛果蕓香堿50mg)，置于50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

精密量取供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，置50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密吸取上述溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)230nm處測(cè)定硝酸毛果蕓香堿的吸收值，另精密量取對(duì)照品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL同上處理，測(cè)定。計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p707。