香連丸－鹽酸小檗堿的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定香連丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥香連丸的測(cè)定。

供試品于索氏提取器中經(jīng)鹽酸-甲醇加熱回流，過濾，濾液蒸干，并用鹽酸-甲醇稀釋，制成供試液。點(diǎn)樣、展開，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λ_S=350nm，λ_R=365nm測(cè)量鹽酸小檗堿吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 鹽酸

2 .甲醇

3 .苯

4.醋酸乙酯

5.異丙醇

6.氨水

1 儀器

1.1 索氏提取器

1.2 薄層掃描儀

1.3分析天平

1.4點(diǎn)樣器

定量毛細(xì)管

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.供試品溶液的制備

精密稱取供試品粉末（過三號(hào)篩-50目)約0.4g，置索氏提取器中，加鹽酸-甲醇（1：100)適量，提取至無色，提取液至水浴上蒸至約20mL，定量轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺(tái)上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2.點(diǎn)樣

2.1對(duì)照品點(diǎn)樣

精密吸取對(duì)照品溶液0.5，1，2，3，4，5µL分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

2.2供試品點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液2μL、對(duì)照品溶液1µL與3µL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-水（6:3:1.5:15:0.3)為展開劑，另槽中加入等體積的濃氨水，預(yù)平衡30min后，上行展開至8cm時(shí)，取出薄層板，晾干

4.含量測(cè)定

4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長(zhǎng)進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λ_S =350nm，λ_R=365nm，測(cè)量對(duì)照品吸收度積分值，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.2供試品測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長(zhǎng)進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λ_S =350nm，λ_R=365nm，測(cè)量供試品吸收度積分值，計(jì)算含量。

周華平，宋廣聰. 薄層掃描法測(cè)定香連丸中鹽酸小檗堿的含量. 基層中藥雜志，2000，14（5)：15-16