六味地黃丸-丹皮酚測定-高效毛細管電泳法

本方法采用高效毛細管電泳法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。

本方法適用于中成藥六味地黃丸。

供試品粉碎后，與硅藻土研勻，無水乙醇超聲波振蕩提取，過濾后定容，加入內標，用高效毛細管電泳儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處檢測丹皮酚的吸收值，計算其含量。

1. 硼砂

2. 乙醇

3. 十二烷基硫酸鈉(SDS)

4. 蘆丁

5. 丹皮酚對照品（中國藥品生物制品檢定所)

6. 水為去離子水

1 儀器

1.1 高效毛細管電泳儀

1.2 色譜柱

未涂層熔硅彈性石英毛細管內徑75μm；，柱長55cm，有效柱長50cm。

1.3紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1緩沖鹽： 20mmol/L SDS－50mmol/L硼砂

2.2檢測波長：274nm

2.3 重力進樣(10cm×5S)

2.4運行電壓：15KV

2.5 電泳溫度：20℃

1. 對照品溶液的制備

精確稱取取丹皮酚對照品9.1mg于10mL量瓶中，無水乙醇溶解并稀釋至刻度，作為對照品溶液。精密吸取丹皮酚對照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于10ml量瓶中，各加入蘆丁內標液1ml，無水乙醇溶液定容至刻度。

2. 內標溶液的制備

稱取蘆丁52mg，用無水乙醇溶解并稀釋至100mL，作為內標。

3.供試品溶液的制備

取六味地黃丸粉碎后，稱取粉末3g，與5g硅藻土(色譜載體，40～60目)混研，研勻，烘干，無水乙醇超聲波振蕩提取30min，過濾后定容至50mL，取該溶液8mL，加入內標 1mL，無水乙醇稀釋至10mL，作為供試品溶液�！�

1. 標準曲線的建立

依法進樣測定，以丹皮酚對照品峰面積與內標峰面積的比值對其濃度繪制標準曲線，計算線性回歸方程。得Y=-0.0279X－0.0411，r=0.9997，線性范圍為18.2～91mg/L。

2. 樣品測定

取供試品溶液，依法進樣測量，記錄各組份峰面積值，計算沒食子酸的含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

趙新峰，孫毓慶，膠束電動毛細管色譜法測定牡丹皮及六味地黃丸中丹皮酚的含量，沈陽藥科大學學報，2002，19（1)：35～37，55