方法名稱： |
龍牡壯骨顆粒—維生素D2的測定—高效液相色譜法本方法采用高效液相色譜法對龍牡壯骨顆粒中維生素D2含量進行測定。 |
應用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法對龍牡壯骨顆粒中維生素D2含量進行測定。 本方法適用于龍牡壯骨的中成藥。 |
方法原理： |
用反相高效液相色譜法測定了龍牡壯骨顆粒中維生素D2 (VD2)。 |
試劑： |
1. 甲醇（分析純) 2 .乙醇（分析純) 3 .抗壞血酸（分析純) 4 .石油醚（分析純) 5 .乙醚（分析純) |
儀器設備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 Resolve Silica C18柱(5μm,200mm×4.6mmi.d.) 2 色譜條件 2.1流動相：甲醇 水=98 2 2.3柱溫：室溫 2.4流速1.5mL/min 2.5檢測波長265nm |
試樣制備： |
1. 標準溶液的配制 稱取VD2對照品,用無水乙醇配置成5個不同質(zhì)量濃度(C,mg/L)的標準溶液。 2. 供試品溶液的制備 龍牡壯骨顆粒約18g,經(jīng)研細后與固體KOH(7.5g)、維生素C(0.1g)混合,并置于250mL平底燒瓶中。用50mL無水乙醇和100mL水使其溶解后于70℃水浴下回流45min,然后用石油醚(每次50mL)萃取3次。合并含有VD2的萃取液并在40～50℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。 |
操作步驟： |
1.標準曲線的繪制 分別取10μL VD2標準溶液進樣，色譜工作站自動計算峰面積(A)，由此得到HPLC檢測的標準工作曲線的線性回歸方程。 2. 供試品的測定 用無水乙醇洗滌蒸發(fā)瓶并移出VD2,定容至100mL,然后進行HPLC測試。 |
參考文獻： |
張俐娜等:高效液相色譜法測定“龍牡壯骨沖劑”中維生素D2.色譜.2000，18（1)：52-54. |
