戊己丸—總生物堿的測定—分光光度法

本方法采用分光光度法測定戊己丸中總生物堿（以鹽酸小檗堿計(jì)算)的含量。

本方法適用于中成藥戊己丸。

供試品置索氏提取器經(jīng)鹽酸-甲醇（1:100)適量回流提取后，定容。取一定量置氧化鋁柱凈化，收集乙醇洗脫液，定容。取一定量加0.05mol/L硫酸溶液定容。置紫外可見分光光度計(jì), 于波長345nm處測定吸收度，以鹽酸小檗堿（C₂₀H₁₇NO₄•HCl)的吸收系數(shù)（E1% 1cm)728計(jì)算總生物堿含量。

1. 鹽酸

2. 甲醇

3. 硫酸(0.05mol/L)

4.氧化鋁柱 (內(nèi)徑0.9cm，中性氧化鋁5g，濕法裝柱，用30mL乙醇預(yù)洗)

1. 紫外-可見分光光度計(jì)

2. 索氏提取器

供試品溶液的制備

取供試品粉末過三號(hào)篩（50目)，精密稱取0.7~0.9g,置索式提取器中，加鹽酸-甲醇（1:100)適量，加熱回流至提取液無色，提取液移至25 mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取5mL照柱色譜法置氧化鋁柱上，用乙醇35mL洗脫，收集洗脫液，置50mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻, 為供試品溶液。

注：“柱色譜法”系指色譜柱為內(nèi)徑均勻，下端縮口的硬質(zhì)玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內(nèi)裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果。

濕法裝柱：將吸附劑與洗脫劑混合，攪拌除去空氣泡，徐徐傾入色譜柱中，然后加入洗脫劑將附著管壁的吸附劑洗下，使色譜柱面平整。

供試品的加入：將供試品溶液沿管壁緩緩加入，注意勿使吸附劑翻起。

供試品的測定

精密量取供試品溶液2mL，置50mL量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法，在345nm波長處測定吸收度。

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在０.３－０.７之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。