方法名稱: |
蘆薈及蘆薈飲料—低分子量有機酸—HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于蘆薈及蘆薈飲料中低分子量有機酸含量的測定 |
方法原理: |
本品加0.5 mol/L HCl在沸水浴中加熱提取,經(jīng)液相色譜分離,在220 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器 高效液相色譜儀(Waters 600泵,2487紫外檢測器),超越2000色譜工作站 色譜條件 色譜柱:AtlantisTM C18分析柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動:10 mmol/LKH2PO4(pH為2.7)-CH3OH(體積比為95∶5);流速:0.8 mL/min;檢測波長:220 nm;進(jìn)樣量:10 μL |
試樣制備: |
對照品溶液制備 分別精確稱取一定量分析純的酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙酸、琥珀酸、富馬酸、草酸和檸檬酸,用二次蒸餾水配制成濃度各為1 mg/mL的八種有機酸的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。用時適當(dāng)稀釋,0.45 μm濾膜過濾,即得。 供試品溶液制備 1)蘆薈葉片:將蘆薈葉片洗凈、吸干表面水分后,稱取鮮重0.5206 g,加2 mL 0.5 mol/LHCl和少量石英砂充分研磨成勻漿,勻漿液倒入試管中,在沸水浴中加熱15~20 min,中間搖動幾次,冷卻后加入4 mL二次水靜置過夜。次日勻漿液用小漏斗過濾至50 mL容量瓶中,再用二次水反復(fù)淋洗試管及殘渣至近50 mL,最后定容至50 mL,過微孔濾膜(水系、孔徑0.45 μm)即得。2)蘆薈飲料:在干凈的燒杯中移取少量市售蘆薈飲料,用0.45 μm的濾膜過濾,移取10 mL至100 mL的容量瓶中,定容搖勻,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取八種有機酸對照液以及蘆薈及蘆薈飲料供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算八種有機酸含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
何海霞,丁健樺,楊新磊. HPLC法測定蘆薈及蘆薈飲料中的低分子量有機酸.食品科技. 2006. ??231~234 |