方法名稱： |
川黃柏-小檗堿、黃柏堿的含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于川黃柏中小檗堿、黃柏堿的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加甲醇-鹽酸(100∶1)超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在350nm(小檗堿)、286nm（黃柏堿)處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 LC-10A高效液相色譜儀；SPD-10A檢測(cè)器；C-R7Aeplus處理器(日本島津公司)。 色譜條件 色譜柱：Luna C18 (2)色譜柱(150.0mm ×6.0mm，5μm，Phenomenex公司)；小檗堿的流動(dòng)相：甲醇-磷酸緩沖液-十二烷基硫酸鈉(60∶40∶0.1)；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：350nm；流速1ml·min-1；黃柏堿的流動(dòng)相：乙腈-0.4mol·L-1氯化氨(12∶88)，柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：286nm；流速1ml·min- 1 。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 取小檗堿對(duì)照品和黃柏堿對(duì)照品適量，精密稱定，分別用甲醇配成58.0μg·ml-1小檗堿和159.2μg·ml-1黃柏堿對(duì)照品溶液 供試品溶液的制備 精密稱取各供試品粉末0.2g(過(guò)40目篩)，甲醇-鹽酸(100∶1)10ml超聲振蕩60min，過(guò)濾，精密量取續(xù)濾液0.5ml，減壓旋蒸至干，加入15ml甲醇溶解，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，作為測(cè)定小檗堿供試液。另精密稱取各供試品粉末0.1g(過(guò)40目篩)，甲醇10ml浸泡過(guò)夜(大于12h)，超聲振蕩30min，過(guò)濾，續(xù)濾液用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾。作為測(cè)定黃柏堿供試液。 |
操作步驟： |
在選定的色譜條件下，分別吸取對(duì)照品和供試品溶液各5μl進(jìn)樣，測(cè)定峰面積值，按外標(biāo)法計(jì)算含量 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
彭愛華，楊宏，楊林等.RP-HPLC測(cè)定不同采收期川黃柏中小檗堿、黃柏堿的含量.華西藥學(xué)雜志. 2006，21(4)：377～379 |
