| 公開(公告)號 | CN1310677C |
| 公開(公告)日 | 2007.04.18 |
| 申請(專利)號 | CN200410039540.7 |
| 申請日期 | 2004.02.05 |
| 專利名稱 | 一種利用腺病毒載體表達狂犬病病毒雙基因制備狂犬病活載體疫苗的方法 |
| 主分類號 | A61K39/205(2006.01)I |
| 分類號 | A61K39/205(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所 |
| 發(fā)明(設計)人 | 柳紀省;殷相平;白銀梅;胡永浩;李志勇;張興旺;王 輝;蘭 喜;李寶玉;劉兆弼 |
| 地址 | 730046甘肅省蘭州市鹽場堡徐家坪11號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 北京金信立方知識產權代理有限公司 |
| 代理人 | 王鴻謀 |
| 國省代碼 | 甘肅;62 |
| 主權項 | 一種利用腺病毒載體表達狂犬病病毒雙基因制備狂犬病活載體疫苗的方法，其特征是它包括如下過程：一、制備目的基因：設計引物，通過PCR的方法擴增出狂犬病病毒抗原蛋白G基因與N基因；二、構建重組復制缺陷型腺病毒穿梭載體：將所述的抗原蛋白G基因與N基因插入到復制缺陷型腺病毒穿梭載體特異性啟動子和終止子之間，構建成含有融合基因G+N的重組復制缺陷型腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV/G+N；三、獲得復制缺陷型腺病毒質粒：將獲得的重組復制缺陷型腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV/G+N與腺病毒骨架載體pAdEasy-1通過在大腸桿菌中質粒間同源重組從而得到重組腺病毒質粒；四、用重組腺病毒質粒產生基因組結構均一的重組腺病毒，包括以下操作：1)酶切，用Pac I酶切腺病毒質粒，2)轉染，轉染293細胞，3)接種293細胞，4)凍存，將基因組結構均一的重組腺病毒凍存；將所述的重組腺病毒制成狂犬病活載體疫苗，直接注射動物進行免疫。 |
| 摘要 | 一種利用腺病毒載體表達狂犬病病毒雙基因制備狂犬病活載體疫苗的方法，包括如下過程：一、制備目的基因：設計引物，擴增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因與N基因；二、構建腺病毒穿梭載體：將抗原蛋白G基因與N基因插入到復制缺陷型腺病毒穿梭載體特異性啟動子和終止子之間，構建成含有融合基因(G+N)的腺病毒穿梭載體(pAdTrack-CMV/G+N)；三、獲得腺病毒質粒：將獲得的重組復制缺陷型腺病毒穿梭載體(pAdTrack-CMV/G+N)與腺病毒骨架載體(pAdEasy-1)通過同源重組得到重組腺病毒質粒；四、用重組腺病毒質粒產生基因組結構均一的重組腺病毒，將重組腺病毒制成狂犬病活載體疫苗。本發(fā)明較之現(xiàn)有狂犬病疫苗更為安全和有效，制作周期較短。 |
| 國際公布 |
