公開(公告)號
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CN1212397C
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公開(公告)日
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2005.07.27
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申請(專利)號
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CN03129217.8
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申請日期
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2003.06.12
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專利名稱
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篩選抗SARS冠狀病毒藥物用非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP
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主分類號
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C12N15/10
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分類號
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C12N15/10;C12N15/33;C12N15/52;C12N15/63;C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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戚中田;潘欣
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地址
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200433 上海市楊浦區(qū)翔殷路800號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海新天專利代理有限公司
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代理人
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丁振英
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP,由SARS-CoV全基因組改造而成,其特征在于在SARS-CoV全基因組的5’端引入啟動(dòng)子序列T7Pro,將S蛋白中第20-1195位氨基酸殘基的編碼序列用編碼綠色熒光蛋白EGFP的基因取代,全基因組的3’端依次引入HDV反義基因組核酶序列HDVRz、T7轉(zhuǎn)錄終止子序列T7Ter,SARS-CoV-EGFP的核苷酸序列如核苷酸序列表1。
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摘要
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本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,是一種可用于篩選抗SARS冠狀病毒藥物及病毒學(xué)基礎(chǔ)研究的非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP。本發(fā)明在SARS冠狀病毒全基因組的5’端引入啟動(dòng)子序列T7 Pro,將S蛋白中與病毒致病性和毒力有關(guān)的外部結(jié)構(gòu)域的編碼序列用編碼增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的EGFP基因取代,全基因組的3’端依次引入HDV反義基因組核酶序列HDV R2、T7轉(zhuǎn)錄終止子序列T7 Ter,建成重組基因SARS-CoV-EGFP,將其插入載體構(gòu)建成重組質(zhì)粒pUC19/SARS-CoV-EGFP,轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,經(jīng)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、加工、包裝成的重組病毒能使被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在熒光顯微鏡下發(fā)出綠色熒光。若在轉(zhuǎn)染的同時(shí)加入抗病毒藥物,就可根據(jù)熒光的有無、強(qiáng)弱,判斷藥物的作用效果,因而可用于篩選抗SARS冠狀病毒的藥物。
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國際公布
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