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篩選抗SARS冠狀病毒藥物用非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP

公開(公告)號 CN1212397C  
公開(公告)日 2005.07.27  
申請(專利)號 CN03129217.8  
申請日期 2003.06.12  
專利名稱 篩選抗SARS冠狀病毒藥物用非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP  
主分類號 C12N15/10  
分類號 C12N15/10;C12N15/33;C12N15/52;C12N15/63;C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 戚中田;潘欣  
地址 200433 上海市楊浦區(qū)翔殷路800號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海新天專利代理有限公司  
代理人 丁振英  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP,由SARS-CoV全基因組改造而成,其特征在于在SARS-CoV全基因組的5’端引入啟動(dòng)子序列T7Pro,將S蛋白中第20-1195位基酸殘基的編碼序列用編碼綠色熒光蛋白EGFP的基因取代,全基因組的3’端依次引入HDV反義基因組核酶序列HDVRz、T7轉(zhuǎn)錄終止子序列T7Ter,SARS-CoV-EGFP的核苷酸序列如核苷酸序列表1。  
摘要 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,是一種可用于篩選抗SARS冠狀病毒藥物及病毒學(xué)基礎(chǔ)研究的非感染性病毒重組基因SARS-CoV-EGFP。本發(fā)明在SARS冠狀病毒全基因組的5’端引入啟動(dòng)子序列T7 Pro,將S蛋白中與病毒致病性和毒力有關(guān)的外部結(jié)構(gòu)域的編碼序列用編碼增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的EGFP基因取代,全基因組的3’端依次引入HDV反義基因組核酶序列HDV R2、T7轉(zhuǎn)錄終止子序列T7 Ter,建成重組基因SARS-CoV-EGFP,將其插入載體構(gòu)建成重組質(zhì)粒pUC19/SARS-CoV-EGFP,轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,經(jīng)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、加工、包裝成的重組病毒能使被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在熒光顯微鏡下發(fā)出綠色熒光。若在轉(zhuǎn)染的同時(shí)加入抗病毒藥物,就可根據(jù)熒光的有無、強(qiáng)弱,判斷藥物的作用效果,因而可用于篩選抗SARS冠狀病毒的藥物。  
國際公布  
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