公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1212392C
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公開(kāi)(公告)日
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2005.07.27
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN03111900.X
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申請(qǐng)日期
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2003.02.27
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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一種以濾紙為唯一固體介質(zhì)的粘細(xì)菌子實(shí)體規(guī)模制備方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N1/20
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分類(lèi)號(hào)
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C12N1/20;C12M1/00;//(C12N1/20,C12R1:01)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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山東大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李越中;韓冠君;劉新利;胡瑋;;扈錫濤
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地址
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250100 山東省濟(jì)南市山大南路27號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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濟(jì)南三達(dá)專(zhuān)利事務(wù)所
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代理人
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李健康
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國(guó)省代碼
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山東;37
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主權(quán)項(xiàng)
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一種以濾紙為唯一固體介質(zhì)的粘細(xì)菌子實(shí)體規(guī)模制備方法,實(shí)施步驟順序如下:(1)發(fā)酵菌株的選擇降解纖維素的粘細(xì)菌菌株中纖維堆囊菌(Sorangiumcellulosum)ATCC15384,ATCC25531,ATCC25569菌株之一;(2)粘細(xì)菌一級(jí)斜面種子的制備取上述菌株接種于固體斜面培養(yǎng)基上,30℃培養(yǎng)4~7天;培養(yǎng)基成分為:大豆蛋白胨5~15g/L,馬鈴薯淀粉15~25g/L,CaCl2.2H2O0.8~5g/L,MgSO4.7H2O0.7~4g/L,F(xiàn)e-EDTA5~10mg/L,瓊脂粉13~17g/L;(3)粘細(xì)菌二級(jí)種子液的制備取上述一級(jí)種子,接種于液體發(fā)酵培養(yǎng)基中,30℃,120轉(zhuǎn)/分搖床培養(yǎng)5~7天;液體發(fā)酵培養(yǎng)基的成分為:地瓜淀粉15~35g/L,水解乳蛋白8~20g/L,CaCl2.2H2O0.8~5g/L,MgSO4.7H2O0.7~4g/L,F(xiàn)e-EDTA5~10mg/L;(4)粘細(xì)菌子實(shí)體的培養(yǎng)制備將濾紙片弄皺褶后放入固體發(fā)酵器內(nèi),由濾紙片為碳源和固體介質(zhì),形成粘細(xì)菌生長(zhǎng)所需的碳源和耗氧所需的孔隙支撐,將制成的粘細(xì)菌二級(jí)種子懸液接種在濾紙片上,通過(guò)噴頭噴灑營(yíng)養(yǎng)液,30℃通氣靜置培養(yǎng)10~15天;上述的培養(yǎng)是指在培養(yǎng)過(guò)程中用噴頭向固體發(fā)酵器內(nèi)以每小時(shí)噴灑pH為7.0~7.2的營(yíng)養(yǎng)液5~10毫升的方法提供氮源、無(wú)機(jī)鹽及微量元素,并保持濾紙片濕度;上述的營(yíng)養(yǎng)液組成為:KNO30.5~0g/L;Na2HPO40.25~0.5g/L;MgSO4·7H2O0~2.0g/L;FeCl30.01~0.05g/L;瓊脂0.5~2.0g/L;微量元素液0(V/V);上述的營(yíng)養(yǎng)液pH在滅菌前用KOH或HCl調(diào)整;(5)子實(shí)體的分離待粘細(xì)菌在濾紙片上較均勻地生成子實(shí)體后,收集濾紙片,分批放入盛有無(wú)菌水的子實(shí)體洗提器中,升溫至80℃保持30-90分鐘,攪拌,通過(guò)沸水洗提的方法將粘細(xì)菌形成的子實(shí)體從濾紙片上分離下來(lái),即得粘細(xì)菌子實(shí)體。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種以濾紙為唯一固體介質(zhì)的粘細(xì)菌子實(shí)體規(guī)模制備方法,它主要是通過(guò)粘細(xì)菌液體菌種的制備、專(zhuān)用固體培養(yǎng)裝置發(fā)酵培養(yǎng)、子實(shí)體洗提裝置水洗提取等工藝環(huán)節(jié)來(lái)大量獲得粘細(xì)菌子實(shí)體。該工藝方法降低了成本,提高了效率,大大提高了工業(yè)化生產(chǎn)的可行性和可放大性。
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國(guó)際公布
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