公開(公告)號
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CN1173030C
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公開(公告)日
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2004.10.27
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申請(專利)號
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CN02134570.8
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申請日期
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2002.08.16
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專利名稱
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抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法
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主分類號
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C12N1/19
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分類號
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C12N1/19;C12N15/12;C12N15/81;C07K14/435
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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廣州市微生物研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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彭中健;楊冠東;杜少平;梁淑娃
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地址
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510250 廣東省廣州市寶崗大道荔福路68號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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廣州粵高專利代理有限公司
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代理人
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何燕玲
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項
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一種抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法,把抗菌肽A及抗菌肽D基因克隆到酵母菌里所得到的抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)和發(fā)酵罐培養(yǎng),其特征在于:(1)搖瓶培養(yǎng):將含抗菌肽AD基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的酵母作為菌種接入三角瓶中,在28-32℃,搖床轉(zhuǎn)速150-300轉(zhuǎn)/分的條件下,培養(yǎng)24-72小時;(2)發(fā)酵罐培養(yǎng):將(1)中已培養(yǎng)好的種子接入發(fā)酵罐,接種量為2-20%,在28-322,攪拌速度180-400轉(zhuǎn)/分,罐壓0.04-0.12兆帕,風(fēng)量1∶0.5-1∶1.8體積/體積/分,pH6.5-7.5的條件下,培養(yǎng)24-96小時,培養(yǎng)過程中加入1%甲醇誘導(dǎo),將發(fā)酵所得抗菌肽在90-110℃下加熱8-20分鐘;其中所用的培養(yǎng)基組分及重量百分含量為:酵母粉0.1-3%、蛋白胨0.5-4%、糖0.1-3%,pH6.5-7.5。
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摘要
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本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域,涉及一種抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法,將含抗菌肽AD基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的工程酵母在合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,表達(dá)抗菌肽基因并分泌抗菌肽到菌體外,發(fā)酵液中抗菌肽的殺菌活力高達(dá)7000單位/毫升,該方法生產(chǎn)的抗菌肽酵母制劑殺菌效價高,質(zhì)量穩(wěn)定,可大規(guī)模生產(chǎn),生產(chǎn)周期短且成本低。
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國際公布
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