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具有綠色熒光蛋白示蹤和抗性篩選標記的RNAi載體pGO

公開(公告)號 CN1539979A  
公開(公告)日 2004.10.27  
申請(專利)號 CN200310108141.7  
申請日期 2003.10.24  
專利名稱 具有綠色熒光蛋白示蹤和抗性篩選標記的RNAi載體pGO  
主分類號 C12N15/63  
分類號 C12N15/63;C12N15/79;A61K48/00;A61P35/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學  
發(fā)明(設計)人 王紅陽;鄢和新;張瑞;陳磊;吳孟超  
地址 200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構 上海新天專利代理有限公司  
代理人 丁振英  
國省代碼 上海;31  
主權項 一種RNAi載體pGO,包括pUC復制起點pUCori、fl復制起點flori、細菌啟動子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TKPolyA、U6啟動子U6promoter和多克隆位點MCS,其特征在于還含有用于表達綠色熒光蛋白基因的轉錄元件,包括CMV啟動子CMVpromoter、增強綠色熒光蛋白基因EGFP和SV40PolyA,以及用于表達真核細胞抗性篩選標志的新霉素基因轉錄元件,包括SV40早期啟動子SV40epromoter和新霉素抗性基因Neo。  
摘要 本發(fā)明涉及醫(yī)藥分子生物學技術領域,是一種可用于特異性抑制靶基因表達的具有綠色熒光蛋白示蹤和真核細胞抗性篩選標記的RNA干擾(RNAi)載體pGO。本發(fā)明RNAi載體pGO是對pEGFP-C2載體的改造,去除了其原有的多克隆位點,在SV40 polyA和fl原核復制起點之間插入帶有相應多克隆位點的U6啟動子構成。只要在U6啟動子下游的多克隆位點中的適當位點插入針對靶基因的siRNA模板,轉染細胞后就可特異并有效地抑制該基因的表達。因而本發(fā)明的RNAi載體pGO可用于制備研究基因功能的試劑或用于抗腫瘤藥物的研究和開發(fā)。  
國際公布  
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