| 公開(公告)號(hào) | CN1439650A |
| 公開(公告)日 | 2003.09.03 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN02106193.9 |
| 申請(qǐng)日期 | 1999.07.01 |
| 專利名稱 | 利用水禽制備多株抗體的方法 |
| 主分類號(hào) | C07K16/02 |
| 分類號(hào) | C07K16/02;C07K1/16 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | 99109616.9 |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 邱義能 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 邱義能 |
| 地址 | 臺(tái)灣省臺(tái)中市 |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 隆天國際知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 高龍鑫;潘培坤 |
| 國省代碼 | 臺(tái)灣;71 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種自水禽產(chǎn)蛋中純化多株抗體的方法，其包括：(1)以水為溶劑，自該產(chǎn)蛋的蛋黃中粗分離IgY：可使用自來水、純水蒸餾水、去離子水，或?yàn)閜H≥5.1的微酸或含0.05％以下的非離子洗滌劑水溶液或0.15-1.0M食鹽水溶液，磷酸鹽緩沖液或三羥甲基氨基甲烷緩沖液；(2)添加硫酸銨，使達(dá)30-50％的飽和度，或添加硫酸鈉，使達(dá)14-20％(w/v)的濃度，在其濃度下重復(fù)進(jìn)行鹽析；(3)使用含疏水基膠體進(jìn)行層析IgY：(a)所述的疏水基膠體選自下列物質(zhì)：丁基瓊脂糖、辛基瓊脂糖、苯基瓊脂糖、烷基瓊脂糖、甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸丁基酯；(b)層析管柱的操作條件：(i)管柱平衡緩沖液在pH7.0-8.0；(ii)平衡緩沖液為1.0M的硫酸銨或硫酸鈉，其電導(dǎo)度為110-200ms/ml；(iii)洗脫方式可用梯度洗脫或單液洗脫：梯度洗脫：A液為前述b(ii)，B液為不帶鹽的緩沖液，單液洗脫：預(yù)先將A液及B液混合并調(diào)整其電導(dǎo)度為45-80 ms/ml。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種利用水禽制備多株抗體的方法，其是將蛋鴨經(jīng)肌肉注射抗原誘發(fā)抗體后收取所產(chǎn)鴨蛋，取出蛋黃后經(jīng)一系列蛋白質(zhì)純化步驟再經(jīng)疏水基膠體層析及透析、脫鹽、濃縮等過程再以SDS-丙烯酰胺膠體電泳，分析可得純度為96％以上之高純度且不含F(xiàn)c端的蛋黃免疫球蛋白。經(jīng)分析，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)此種抗體制備方法不但可制成具高特異性及稀釋能力的多株抗體，更可有效避免以往常存在以哺乳類為中間宿主所制成的多株抗體所產(chǎn)生的假陽性反應(yīng)。 |
| 國際公布 |
