公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1142281C
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公開(kāi)(公告)日
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2004.03.17
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN98100248.X
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申請(qǐng)日期
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1998.01.19
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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重組人紅細(xì)胞生成素制劑的制備生產(chǎn)方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/79
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/79;C12N15/67;C12N1/00;C12P21/02;C07K14/505
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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沈陽(yáng)三生制藥股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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婁丹;徐莉萍;鄒鐘誠(chéng)
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地址
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110141 遼寧省沈陽(yáng)市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)十號(hào)路1甲3高軍
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頒證日
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2004.03.17
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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遼寧;21
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主權(quán)項(xiàng)
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一種表達(dá)人紅細(xì)胞生成素的方法,包括對(duì)于含有編碼人紅細(xì)胞生成素的核苷酸序列的CHO細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),其特征在于,先用含有胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基將含有編碼人紅細(xì)胞生成素的核苷酸序列的CHO細(xì)胞接種液在細(xì)胞罐內(nèi)擴(kuò)增培養(yǎng),再將培養(yǎng)基更換為無(wú)血清的合成培養(yǎng)基,連續(xù)灌流培養(yǎng),所述無(wú)血清的合成培養(yǎng)基中含有胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、糖及碳酸氫鈉。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種大規(guī)模生產(chǎn)人紅細(xì)胞生成素的制劑方法。該方法包括用添加了胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,于特定培養(yǎng)條件下培養(yǎng)攜帶人促紅細(xì)胞生成素DNA編碼序列的被轉(zhuǎn)化的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,以獲得該蛋白質(zhì)產(chǎn)物的高表達(dá)。然后對(duì)富含人紅細(xì)胞生成素的收獲液依次進(jìn)行親和層析、離子交換、反相高效液相及凝膠過(guò)濾純化,以獲得純度高并具有高生物活性的人紅細(xì)胞生成素。
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國(guó)際公布
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