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重組人紅細(xì)胞生成素制劑的制備生產(chǎn)方法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心 藥學(xué)論壇 沈陽(yáng)三生制藥股份有限公司/婁丹;徐莉萍;鄒鐘誠(chéng)
公開(kāi)(公告)號(hào) CN1142281C  
公開(kāi)(公告)日 2004.03.17  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN98100248.X  
申請(qǐng)日期 1998.01.19  
專(zhuān)利名稱(chēng) 重組人紅細(xì)胞生成素制劑的制備生產(chǎn)方法  
主分類(lèi)號(hào) C12N15/79  
分類(lèi)號(hào) C12N15/79;C12N15/67;C12N1/00;C12P21/02;C07K14/505  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 沈陽(yáng)三生制藥股份有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 婁丹;徐莉萍;鄒鐘誠(chéng)  
地址 110141 遼寧省沈陽(yáng)市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)十號(hào)路1甲3高軍  
頒證日 2004.03.17  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國(guó)省代碼 遼寧;21  
主權(quán)項(xiàng) 一種表達(dá)人紅細(xì)胞生成素的方法,包括對(duì)于含有編碼人紅細(xì)胞生成素的核苷酸序列的CHO細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),其特征在于,先用含有胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基將含有編碼人紅細(xì)胞生成素的核苷酸序列的CHO細(xì)胞接種液在細(xì)胞罐內(nèi)擴(kuò)增培養(yǎng),再將培養(yǎng)基更換為無(wú)血清的合成培養(yǎng)基,連續(xù)灌流培養(yǎng),所述無(wú)血清的合成培養(yǎng)基中含有胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、糖及碳酸氫鈉。  
摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種大規(guī)模生產(chǎn)人紅細(xì)胞生成素的制劑方法。該方法包括用添加了胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,于特定培養(yǎng)條件下培養(yǎng)攜帶人促紅細(xì)胞生成素DNA編碼序列的被轉(zhuǎn)化的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,以獲得該蛋白質(zhì)產(chǎn)物的高表達(dá)。然后對(duì)富含人紅細(xì)胞生成素的收獲液依次進(jìn)行親和層析、離子交換、反相高效液相及凝膠過(guò)濾純化,以獲得純度高并具有高生物活性的人紅細(xì)胞生成素。  
國(guó)際公布  
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