公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1467295A
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公開(kāi)(公告)日
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2004.01.14
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN03100580.2
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申請(qǐng)日期
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2003.01.20
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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一種以微生物克隆載體生產(chǎn)治療血管疾病基因藥物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-2裸DNA的方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C12P19/34
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分類(lèi)號(hào)
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C12P19/34;C12N15/12;A61K48/00;A61P9/10;C12Q1/68
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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甘肅亞盛鹽化工業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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周長(zhǎng)生;張金文;陳正華
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地址
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730030甘肅省蘭州市城關(guān)區(qū)張掖路219號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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甘肅省專(zhuān)利服務(wù)中心
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代理人
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田玉蘭
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國(guó)省代碼
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甘肅;62
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主權(quán)項(xiàng)
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一種包含有人源性VEGF啟動(dòng)子(hVEGF promoter)和鼠源性VEGF-2cDNA(mVEGF-2)的載體,其特征在于:該載體的hVEGF啟動(dòng)子和mVEGF-2定向連接在一起,hVEGF啟動(dòng)子位于mVEGF-2上游,使mVEGF-2基因被hVEGF啟動(dòng)子所驅(qū)動(dòng)。
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摘要
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本方法從受孕小鼠胚胎克隆了鼠源性VEGF-2(mVEGF-2)基因,然后從新生兒胎盤(pán)克隆人源性VEGF啟動(dòng)子(hVEGF promoter),并使mVEGF-2被hVEGFpromoter所驅(qū)動(dòng),插入哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pEGSH中,構(gòu)建出能夠在原核細(xì)胞中以高拷貝數(shù)產(chǎn)生大量DNA、并能在原核和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中均能表達(dá)的載體pEGVPV。用這載體轉(zhuǎn)化E.coli DH5α后,獲得的DNA拷貝數(shù)有2000個(gè)/細(xì)胞之多,從細(xì)胞培養(yǎng)物中分離的DNA產(chǎn)量能夠達(dá)到1.5mg/L。本發(fā)明還提供了一種以微生物生產(chǎn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-2(vascular endothelial growth factor2,VEGF-2)DNA藥物的方法。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子能特異性地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,強(qiáng)烈促進(jìn)其增殖和血管形成,并有升高血管通透性的作用。缺血型動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)表明,向局部缺血組織顯微注射該裸DNA可促進(jìn)新生血管形成,增強(qiáng)側(cè)枝循環(huán)的建立,有效地改善了缺血組織的血液供應(yīng)。本方法可提供一種治療血管疾病的新方案。
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國(guó)際公布
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