黃連上清丸—大黃酸的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定黃連上清丸中大黃酸的含量。

本方法適用于中成藥黃連上清丸。

將供試品置索氏提取器內(nèi)，加氯仿浸泡提取，提取液以氫氧化鈉水溶液洗滌至無(wú)色，合并洗滌液作為供試品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液和供試品液，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)大黃酸吸收值，以外標(biāo)法計(jì)算含量。

1. 乙腈（色譜純)

2. 0.1%(mL/mL)磷酸水溶液

3. 氯仿

4. 0.5％氫氧化鈉水溶液

5. 甲醇

1 儀器

1.1 索式提取器

1.2 高效液相色譜

1.3 色譜柱

Spherrisorb C₁₈ 柱 (300 × 4.6mm，5µm)。

1.4 紫外吸收檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 0.1%磷酸水溶液 = 20 80

2.2 流速：0.6mL/min

2.3 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.4 柱溫：45℃

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末1g。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取大黃酸對(duì)照品3.2mg，甲醇溶解，定容至100mL，作為對(duì)照品溶液。

3.供試品溶液的制備

將供試品置索氏提取器內(nèi)，加氯仿浸泡過(guò)夜，提取8h，提取液以0.5％氫氧化鈉水溶液100mL分次洗滌至無(wú)色，合并洗滌液至100mL量瓶中，以0.5％氫氧化鈉水溶液定容，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取對(duì)照品溶液1.25、2.5、5.0、7.5、10、15µL，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定大黃酸的吸收值，以對(duì)照品溶液進(jìn)樣量對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取對(duì)照品溶液2µL、15µL，供試品液10µL，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定大黃酸的吸收值，以外標(biāo)法計(jì)算出其含量。

夏勤. HPLC法測(cè)定黃連上清丸中大黃酸的含量. 江蘇藥學(xué)與臨床研究，2001，9(3)：15-16.